পণ্য বিবরণী
বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা (WHO) নির্দেশনা দেয় যে অ্যান্টিজেন-শনাক্তকারী দ্রুত ডায়াগনস্টিক পরীক্ষা (Ag-RDRs) নিউক্লিক অ্যাসিড পরিবর্ধন পরীক্ষার (NAATs) তুলনায় সক্রিয় SARS-CoV-2 সংক্রমণ নির্ণয়ের একটি দ্রুত এবং কম ব্যয়বহুল উপায় সরবরাহ করতে পারে এবং WHOও সুপারিশ করে। যে Ag-RDTs ন্যূনতম কর্মক্ষমতা প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে প্রাথমিক কেস সনাক্তকরণ, যোগাযোগের সন্ধান, প্রাদুর্ভাবের তদন্তের সময় এবং সম্প্রদায়গুলিতে রোগের প্রবণতা নিরীক্ষণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।
বৈশিষ্ট্য
● ব্যাপক:একটি পরীক্ষায় তিনটি লক্ষ্য জিন সনাক্ত করে
● সামঞ্জস্যপূর্ণ:CY5, FAM, VIC/HEX চ্যানেলগুলির সাথে সাধারণ সরঞ্জামগুলির সাথে অভিযোজিত।
● চমৎকার কর্মক্ষমতা:উচ্চ সংবেদনশীলতা এবং নির্দিষ্টতা, LOD = 200 কপি/মিলি।
টেকনিক্যাল প্যারামিটার
| প্যাকিং স্পেসিফিকেশন | 50টি পরীক্ষা/কিট, 100টি পরীক্ষা/কিট |
| টার্গেট অঞ্চল | ORF1ab, N, E |
| প্রযোজ্য নমুনা | স্পুটাম, অরোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব |
| সনাক্তকরণের সীমা | 200 কপি/মিলি |
| মোট কাকতালীয় হার | 99.55% |
| Ct মান (CV,%) | ≤5.0% |
| ইতিবাচক কাকতালীয় হার | 99.12% |
| নেতিবাচক কাকতালীয় হার | 100% |
| স্টোরেজ শর্ত এবং মেয়াদ শেষ হওয়ার তারিখ | -20±5℃ এ সংরক্ষিত, এবং 12 মাসের জন্য অস্থায়ীভাবে বৈধ। |
| অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ | হ্যাঁ |
| ক্যাটালগ নম্বর | A7793YF-50T, A7793YF-100T |
| সার্টিফিকেশন | CE |
| নমুনা | নাসোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব, অরোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব, অ্যালভিওলার ল্যাভেজ ফ্লুইড, লালা এবং থুতু |
| প্রযোজ্য যন্ত্র | ABI 7500, Roche Light Cycler 480Ⅱ, Roche Cobas z 480, SLAN-96P রিয়েল-টাইম পিসিআর সিস্টেম |
পরীক্ষা পদ্ধতি
1. নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন
এক্সট্রাকশন কিটের ম্যানুয়াল অনুযায়ী অপারেশন করা উচিত।
2. সিস্টেম প্রস্তুতি:
1) বিকারকটি বের করুন এবং বিকারকটিকে সম্পূর্ণভাবে গলা দিন।অবিলম্বে মিশ্রণ এবং সেন্ট্রিফিউজ উল্টে দিন।N পরীক্ষার প্রতিক্রিয়া (N = পরীক্ষিত নমুনার সংখ্যা + ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ + নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ + 1) প্রতিক্রিয়া সিস্টেমের জন্য প্রস্তুত করা হয়, যথাক্রমে, নিম্নরূপ।
| ভোম্পোনেন্টস | 1 প্রতিক্রিয়া সিস্টেমের জন্য ভলিউম | N বিক্রিয়া সিস্টেমের জন্য আয়তন |
| নিউক্লিক অ্যাসিড পরিবর্ধন প্রতিক্রিয়া সমাধান মিক্স (A7793YF) | 18 µL | 18 µL * N |
| এনজাইম মিশ্রণ | 2 µL | 2 µL * N |
| মোট আয়তন | 20 μL | 20 µL * N |
2) প্রতিক্রিয়া বন্টন: প্রতিক্রিয়া দ্রবণটি মিশ্রিত এবং সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল এবং প্রতিটি টিউব 20μL পরিমাণে পিসিআর টিউবে একটি ফ্লুরোসেন্স পিসিআর যন্ত্রের জন্য উপযুক্ত ছিল।
3. লোড হচ্ছে
নিষ্কাশিত নমুনার 5μL নিউক্লিক অ্যাসিড, ধনাত্মক নিয়ন্ত্রণ নিউক্লিক অ্যাসিড এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ নিউক্লিক অ্যাসিড বিক্রিয়া সিস্টেমে যোগ করা হয় এবং মোট বিক্রিয়ার পরিমাণ হল 25μL।টিউব কভারটি বেঁধে দিন এবং কয়েক সেকেন্ড সেন্ট্রিফিউগেশনের পরে পরিবর্ধন পরীক্ষার এলাকায় নিয়ে যান।
4. পিসিআর পরিবর্ধন পরীক্ষা
1) প্রশস্তকরণ সনাক্তকরণের জন্য ফ্লুরোসেন্ট পিসিআর পরিবর্ধন যন্ত্রে পিসিআর প্রতিক্রিয়া টিউব রাখুন।
2) সাইকেল প্যারামিটার সেটিং:
| কার্যক্রম | চক্রের সংখ্যা | তাপমাত্রা | প্রতিক্রিয়া সময় | |
| 1 | 1 | 50℃ | 10 মিনিট | |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 সেকেন্ড | |
| 3 | 45 | 95℃ | 5 সেকেন্ড | |
| 60℃ | 30 সেকেন্ড | ফ্লুরোসেন্স সংগ্রহ | ||
3) সনাক্তকরণ সেটিংস:
সনাক্তকরণ চ্যানেলগুলি যথাক্রমে ORF1ab, N জিন এবং ই জিন, RNase P অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণের সাথে সম্পর্কিত FAM, VIC ,ROX এবং CY5 এ সেট করা হয়েছে।ABI 7500 যন্ত্রের জন্য "কোনচার ডাই" এবং "প্যাসিভ রেফারেন্স" "কেউ নয়" এ সেট করা হয়েছে।ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ, নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ, এবং নমুনা (অজানা) সেট করুন যাতে নমুনাগুলি সঙ্গতিপূর্ণ হয় এবং "নমুনা নাম" কলামে নমুনার নাম সেট করুন।
X-POCH16 এর জন্য, অপারেশন এবং প্রোগ্রামটি নিম্নরূপ:
1) স্ব-পরীক্ষা সম্পূর্ণ হওয়ার পরে, ঢাকনাটি খুলুন এবং পিসিআর প্রতিক্রিয়া টিউবগুলিকে যন্ত্রের মনোনীত অবস্থানে রাখুন।
2) "এক্সপার" নির্বাচন করে শুরু করুন।বিকল্প"সমস্ত" বিকল্পটি নির্বাচন করুন বা স্ক্রীনের বাম দিকে প্রতিক্রিয়া এলাকাটি ম্যানুয়ালি নির্বাচন করুন।
3) "লোড" বিকল্পটি নির্বাচন করুন;পরীক্ষা প্রোগ্রাম নির্বাচন করুন;"সম্পন্ন" এবং "রান" এ ক্লিক করুন।প্রোগ্রামটি সম্পূর্ণ হতে 30 মিনিট 42 সেকেন্ড সময় নেয়।
ডিফল্ট প্রোগ্রামের সনাক্তকরণ চ্যানেলগুলি যথাক্রমে ORF1ab, N জিন এবং E Gene, RNase P অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণের সাথে সম্পর্কিত FAM, VIC, ROX এবং CY5 এ সেট করা হয়েছে।
ডিফল্ট প্রোগ্রামের সাইকেল প্যারামিটার নিম্নরূপ:
| কার্যক্রম | সংখ্যা | তাপমাত্রা | প্রতিক্রিয়া সময় |
| 1 | 1 | 50℃ | ২ মিনিট |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 সেকেন্ড |
| 3 | 41 | 95℃ | 2 সেকেন্ড |
| 60℃ | 13 সেকেন্ড | ফ্লুরোসেন্স |
5. থ্রেশহোল্ড সেটিং
বিশ্লেষিত চিত্র অনুসারে, প্রারম্ভিক মান, বেসলাইন এবং থ্রেশহোল্ড মানের শেষ মান (প্রারম্ভ মান এবং শেষ মান যথাক্রমে 3 এবং 15 সেট করার পরামর্শ দেওয়া হয়, এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণের পরিবর্ধন বক্ররেখা সমতল হতে সমন্বয় করা হয়) থ্রেশহোল্ড লাইনের চেয়ে কম), স্বয়ংক্রিয়ভাবে বিশ্লেষণের নমুনা Ct মান পেতে বিশ্লেষণে ক্লিক করুন।রিপোর্ট ইন্টারফেসে ফলাফল দেখুন.
6. মান নিয়ন্ত্রণ স্ট্যান্ডার্ড
কিটের প্রতিটি নিয়ন্ত্রণ অবশ্যই 'S' বক্ররেখার সাথে নিম্নলিখিত প্রয়োজনীয়তাগুলি পূরণ করবে, অন্যথায় পরীক্ষাটি অবৈধ।
| সনাক্তকরণ চ্যানেল | নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ | ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ |
| FAM(ORF1ab) | না সিটি | Ct≤38 |
| ভিআইসি (এন) | না সিটি | Ct≤38 |
| ROX(E) | না সিটি | Ct≤38 |
| CY5(RP) | না সিটি | Ct≤38 |
【কাট-অফ মান】
100টি অরোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব নমুনা এবং 100টি থুতুর নমুনার ফলাফল অনুসারে এবং ROC বক্ররেখা পদ্ধতিতে, OFR1ab-এর কাট-অফ মান, এই কিটের এন জিন ই জিন হল Ct = 38
FAQ
এই কিটে, রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্ট পিসিআর প্রযুক্তির প্রাইমার এবং প্রোবগুলি যথাক্রমে 2019-nCoV-এর ORF1ab, N এবং E জিনের সংরক্ষিত এবং নির্দিষ্ট অঞ্চলগুলির জন্য ডিজাইন করা হয়েছে।পিসিআর পরিবর্ধনের সময়, প্রোবটি টেমপ্লেটের সাথে আবদ্ধ হয় এবং প্রোবের 5'-এন্ড রিপোর্টার গ্রুপটি Taq এনজাইম (5'→3' এক্সোনিউক্লিজ অ্যাক্টিভিটি) দ্বারা ক্লিভ করা হয়, যার ফলে একটি ফ্লুরোসেন্ট সংকেত তৈরি করার জন্য quenching গ্রুপ থেকে দূরে সরে যায়। .রিয়েল-টাইম পরিবর্ধন বক্ররেখা স্বয়ংক্রিয়ভাবে সনাক্ত করা ফ্লুরোসেন্স সিগন্যালের উপর ভিত্তি করে প্লট করা হয় এবং নমুনা Ct মান গণনা করা হয়।FAM, VIC এবং ROX ফ্লুরোফোরগুলিকে ORF1ab জিন, এন জিন এবং ই জিন প্রোবগুলিতে লেবেল করা হয়েছে।একটি পরীক্ষা ব্যবহার করে, 2019-nCoV-এর উপরের তিনটি জিনের গুণগত সনাক্তকরণ একযোগে করা যেতে পারে।
মিথ্যা-নেতিবাচক ফলাফল এড়াতে ক্লিনিকাল নমুনা সংগ্রহ, পরিচালনা, নিষ্কাশন এবং RT-PCR প্রক্রিয়া নিরীক্ষণের জন্য RNase P জিনকে লক্ষ্য করে কিটটিতে একটি অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ সরবরাহ করা হয়েছে।অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ একটি CY5 ফ্লুরোসেন্ট গ্রুপের সাথে লেবেলযুক্ত।
1. যন্ত্রটি স্বাভাবিক হলে পরীক্ষার ফলাফল বিশ্লেষণ ও ব্যাখ্যা করুন এবং ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ, নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ এবং অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ পরীক্ষার ফলাফল মান নিয়ন্ত্রণের মান পূরণ করে।
2. অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণের পরিবর্ধন বক্ররেখা (CY5) একটি সাধারণ S বক্ররেখা এবং Ct ≤ 38 দেখায়, লক্ষ্য জিনের ফলাফলের ব্যাখ্যা নিম্নলিখিত শর্তগুলির অধীন।
| সনাক্তকরণ চ্যানেল | লক্ষ্য জিনের ফলাফল ব্যাখ্যা | ||
| এফএমএ | ভিআইসি (এন জিন) | ROX (ই জিন) | |
| Ct≤38 | Ct≤38 | Ct≤38 | একটি সাধারণ S পরিবর্ধন বক্ররেখার সাথে, Ct মান হল≤38, সংশ্লিষ্ট লক্ষ্য জিনটি ইতিবাচক। |
| 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | একটি সাধারণ S পরিবর্ধন বক্ররেখা সহ, নমুনার সংশ্লিষ্ট লক্ষ্য জিন পুনরায় পরীক্ষা করুন। যদি একটি সাধারণ S পরিবর্ধন বক্ররেখার সাথে Ct মান＜ 40 হয়, তাহলে সংশ্লিষ্ট লক্ষ্য জিনটি ধনাত্মক হয়;Ct মান≥40 হলে, সংশ্লিষ্ট লক্ষ্য জিনটি ঋণাত্মক হয় |
| Ct≥40 | Ct≥40 | Ct≥40 | সংশ্লিষ্ট লক্ষ্য জিন নেতিবাচক |
2019-nCoV-এর ফলাফলের ব্যাখ্যা:
ORF1ab, এন জিন এবং ই জিনের ফলাফল অনুসারে, নিম্নরূপ ব্যাখ্যা:
1) সনাক্ত করা জিনের মধ্যে যদি দুই বা তিনটি জিন ইতিবাচক হয়, 2019-nCoV ইতিবাচক;
2) সনাক্ত করা জিনগুলির মধ্যে শুধুমাত্র একটি বা কোনটিই যদি ইতিবাচক না হয় তবে 2019-nCoV নেতিবাচক।
দ্রষ্টব্য: ধনাত্মক নমুনার পরিবর্ধন বক্ররেখা একটি সাধারণ S বক্ররেখার সাথে হওয়া উচিত।যাইহোক, লক্ষ্য ঘনত্ব খুব বেশি হলে, অভ্যন্তরীণ মান নিয়ন্ত্রণ প্রশস্ত করা যাবে না এবং নমুনা সরাসরি ইতিবাচক হিসাবে বিচার করা যেতে পারে।টার্গেট জিনের যেকোনো দুটি Ct≤38 পেলে, 2019-nCoV ইতিবাচক।টার্গেট জিনের যেকোনো দুটি Ct≥40 পেলে, 2019-nCoV নেতিবাচক।যদি Ct≥40, বা কোন মান না দেখায়, টার্গেট জিনের ফলাফলের ব্যাখ্যা নেতিবাচক।
3. যদি FAM, VIC, ROX এবং Cy5 চ্যানেলের সমস্ত Ct মান 38-এর বেশি হয় বা কোনও সুস্পষ্ট সাধারণ S পরিবর্ধন বক্ররেখা না থাকে:
1) নমুনায় এমন পদার্থ(গুলি) আছে যা PCR প্রতিক্রিয়াকে বাধা দেয়।পুনরায় পরীক্ষা করার জন্য নমুনাটি পাতলা করার পরামর্শ দেওয়া হয়।
2) নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন প্রক্রিয়া অস্বাভাবিক, তাই এটি পুনরায় নিষ্কাশন করার পরামর্শ দেওয়া হয়
পুনরায় পরীক্ষার জন্য নিউক্লিক অ্যাসিড।
3) নমুনা নেওয়ার সময় এই নমুনাটি একটি যোগ্য নমুনা ছিল না, বা অবনমিত হয়েছিল
পরিবহন এবং স্টোরেজ সময়।
তারা 2 উপায়ে আমরা এই পরিস্থিতি সনাক্ত করতে পারি: NAAT এবং অ্যান্টিজেন।
(লস এঞ্জেলেসের সিডিসি থেকে আসে)
