Detalye sa Produkto
Ang World Health Organization (WHO) naggiya nga ang antigen-detecting rapid diagnostic tests (Ag-RDRs) makahatag og mas paspas ug mas barato nga paagi sa pag-diagnose sa aktibo nga impeksyon sa SARS-CoV-2 kaysa nucleic acid amplification tests (NAATs), ug girekomenda usab sa WHO. nga ang mga Ag-RDT nga nakab-ot sa minimum nga mga kinahanglanon sa pasundayag mahimong magamit alang sa pangunang pagtuki sa kaso, pagsubay sa kontak, panahon sa mga imbestigasyon sa outbreak ug sa pagmonitor sa mga uso sa insidente sa sakit sa mga komunidad.
Mga bahin
● Komprehensibo:Tulo ka target nga gene ang nakit-an sa usa ka pagsulay
● compatible:Mapahiangay sa sagad nga kagamitan nga adunay CY5, FAM, VIC / HEX nga mga kanal.
● Maayo nga performance:Taas nga pagkasensitibo ug espesipiko, LOD = 200 ka kopya/ml.
Teknikal nga Parameter
| Pagtino sa Pag-pack | 50 ka pagsulay/kit, 100 ka pagsulay/kit |
| Target nga Rehiyon | ORF1ab, N, E |
| Magamit nga Sampol | Sputum, Oropharyngeal Swab |
| Limitasyon sa Detection | 200 ka kopya/ml |
| Kinatibuk-ang Rate sa Sulagma | 99.55% |
| Ct nga bili (CV,%) | ≤5.0% |
| Positibo nga Rate sa Sulagma | 99.12% |
| Negatibo nga Rate sa Sulagma | 100% |
| Mga Kondisyon sa Pagtipig ug Petsa sa Pag-expire | Gitipigan sa -20±5 ℃, ug balido nga temporaryo sulod sa 12 ka bulan. |
| Internal nga Pagkontrol | Oo |
| Numero sa Katalogo | A7793YF-50T, A7793YF-100T |
| Sertipikasyon | CE |
| Mga espesimen | Nasopharyngeal swab, Oropharyngeal swab, Alveolar lavage fluid, Laway ug sputum |
| Magamit nga Instrumento | ABI 7500, Roche Light Cycler 480Ⅱ, Roche Cobas z 480, SLAN-96P Real-Time PCR System |
Pamaagi sa Pagsulay
1. Pagkuha sa Nucleic Acid
Ang operasyon kinahanglan nga himuon sumala sa manwal sa kit sa pagkuha.
2. Pagpangandam sa Sistema:
1) Kuhaa ang reagent ug tunawon sa hingpit ang reagent.Balika dayon ang sagol ug centrifuge.N nga mga reaksyon sa pagsulay (N = gidaghanon sa mga sample nga sulayan + positibo nga kontrol + negatibo nga kontrol + 1) giandam alang sa mga sistema sa reaksyon, matag usa, ingon sa mosunod.
| Vomponents | Volume para sa 1 reaction system | Volume para sa N reaction system |
| Ang nucleic acid amplification reaction solution Mix (A7793YF) | 18 µL | 18 µL * N |
| Sagol nga enzyme | 2 µL | 2 µL * N |
| Kinatibuk-ang gidaghanon | 20 µL | 20 µL * N |
2) Pag-apod-apod sa reaksyon: Ang solusyon sa reaksyon gisagol ug gi-centrifuged, ug ang matag tubo gihatag sa kantidad nga 20μL sa usa ka PCR tube nga angay alang sa usa ka fluorescence PCR apparatus.
3. Nagkarga
Ang 5μL sa gikuha nga sample nucleic acid, positibo nga kontrol sa nucleic acid ug negatibo nga pagkontrol sa nucleic acid gidugang sa mga sistema sa reaksyon, ug ang kinatibuk-ang gidaghanon sa reaksyon mao ang 25μL.I-fasten ang tabon sa tubo ug ibalhin kini ngadto sa amplification test area human sa pipila ka segundos sa centrifugation.
4. PCR Amplification Assay
1) Ibutang ang PCR reaction tube sa fluorescent PCR amplification instrument para sa amplification detection.
2) Pag-set sa parameter sa siklo:
| Programa | Gidaghanon sa mga siklo | Temperatura | Panahon sa reaksyon | |
| 1 | 1 | 50 ℃ | 10 min | |
| 2 | 1 | 95 ℃ | 30 ka seg | |
| 3 | 45 | 95 ℃ | 5 sec | |
| 60 ℃ | 30 ka seg | Koleksyon sa Fluorescence | ||
3) Mga setting sa pagkakita:
Ang detection channels gitakda sa FAM, VIC, ROX ug CY5, katumbas sa ORF1ab, N gene, ug E Gene, RNase P internal control, matag usa.Ang "Quencher Dye" ug "Passive Reference" gitakda sa "Wala" para sa ABI 7500 nga instrumento.I-set ang Positive Control, Negative Control, ug Sample (Unknown) sa han-ay sa mga sample, ug ibutang ang sample name sa "Sample Name" column.
Para sa X-POCH16, ang operasyon ug programa mao ang mosunod:
1) Human makompleto ang self-test, ablihi ang taklob ug ibutang ang PCR reaction tubes sa gitudlo nga mga posisyon sa instrumento.
2) Sugdi pinaagi sa pagpili sa "Exper."kapilian.Pilia ang "Tanan" nga kapilian o pilia sa kamut ang lugar sa reaksyon sa wala nga bahin sa screen.
3) Pilia ang "LOAD" nga kapilian;pilia ang programa sa pagsulay;i-klik ang "DONE" ug ang "RUN".Ang programa nagkinahanglan og 30min42s aron makompleto.
Ang detection channels sa Default nga programa gitakda sa FAM, VIC, ROX ug CY5, katumbas sa ORF1ab, N gene, ug E Gene, RNase P internal control, matag usa.
Ang cycle parameter sa Default nga programa mao ang mosunod:
| Programa | Gidaghanon sa | Temperatura | Panahon sa reaksyon |
| 1 | 1 | 50 ℃ | 2 min |
| 2 | 1 | 95 ℃ | 30 sec |
| 3 | 41 | 95 ℃ | 2 sec |
| 60 ℃ | 13 sec | Fluorescence |
5. Pagbutang sa Threshold
Sumala sa gi-analisar nga hulagway, i-adjust ang Start value, End value sa Baseline ug Threshold value (Start value ug end value girekomendar nga ibutang nga 3 ug 15 matag usa, ug ang amplification curve sa negatibong kontrol gi-adjust aron mahimong flat o ubos sa threshold Line), i-klik ang Analysis aron awtomatikong makuha ang pagtuki sa sample Ct value.Tan-awa ang mga resulta sa Report interface.
6. Quality Control Standard
Ang matag kontrol sa kit kinahanglan makatagbo sa mosunod nga mga kinahanglanon nga adunay 'S' nga kurba, kung dili ang eksperimento dili balido.
| Mga kanal sa pagkakita | Negatibo nga pagkontrol | Positibo nga pagkontrol |
| FAM(ORF1ab) | Walay Ct | Ct≤38 |
| VIC(N) | Walay Ct | Ct≤38 |
| ROX(E) | Walay Ct | Ct≤38 |
| CY5(RP) | Walay Ct | Ct≤38 |
【Giputol nga Bili】
Sumala sa resulta sa 100 ka oropharyngeal swab sample ug 100 ka sputum sample, ug sa ROC curve method, ang Cut-off value sa OFR1ab, N genes E Gene niini nga kit mao ang Ct = 38
FAQ
Sa kini nga kit, ang mga primer ug probe sa real-time nga fluorescent PCR nga teknolohiya gidisenyo alang sa gitipigan ug piho nga mga rehiyon sa ORF1ab, N ug E nga gene sa 2019-nCoV matag usa.Atol sa pagpadako sa PCR, ang probe nagbugkos sa template, ug ang 5'-end reporter nga grupo sa probe gibuak sa Taq enzyme (5'→3' exonuclease nga kalihokan), sa ingon nagpalayo gikan sa quenching group aron makamugna og fluorescent signal. .Ang tinuod nga panahon nga amplification curve awtomatik nga giplano base sa namatikdan nga fluorescence signal, ug ang sample nga Ct nga kantidad gikalkula.Ang FAM, VIC ug ROX fluorophores gimarkahan sa ORF1ab gene, N gene ug E gene probes.Pinaagi sa paggamit sa usa ka pagsulay, ang qualitative detection sa tulo ka mga gene sa ibabaw sa 2019-nCoV mahimong dungan nga himuon.
Gihatagan ang kit og internal control nga nagpunting sa RNase P gene aron mamonitor ang pagkolekta, pagdumala, pagkuha ug proseso sa RT-PCR sa klinika aron malikayan ang dili tinuod nga mga resulta.Ang internal nga kontrol gimarkahan sa usa ka CY5 fluorescent nga grupo.
1. Pag-analisar ug paghubad sa mga resulta sa pagsulay kung ang instrumento normal, ug ang positibo nga kontrol, ang negatibo nga kontrol ug ang internal nga kontrol nga resulta sa pagsulay nakab-ot ang kalidad sa pagkontrol sa sumbanan.
2. Ang amplification curve sa internal control (CY5) nagpakita sa tipikal nga S curve ug Ct ≤ 38, ang interpretasyon sa mga resulta sa target nga mga gene gipailalom sa mosunod nga mga kondisyon.
| Mga kanal sa pagkakita | Paghubad sa mga resulta sa target nga mga gene | ||
| FMA | VIC (N nga gene) | ROX (E gene) | |
| Ct≤38 | Ct≤38 | Ct≤38 | Uban sa usa ka tipikal nga S amplification curve, ang Ct nga kantidad kay≤38, ang katugbang nga target nga gene positibo. |
| 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | Uban sa tipikal nga S amplification curve, sulayi pag-usab ang katugbang nga target nga gene sa sample pag-usab. Kung ang Ct value＜ 40 nga adunay tipikal nga S amplification curve, ang katugbang nga target gene positibo;kung ang Ct value≥40, negatibo ang katumbas nga target nga gene |
| Ct≥40 | Ct≥40 | Ct≥40 | Ang katugbang nga target nga gene negatibo |
Paghubad sa mga resulta alang sa 2019-nCoV:
Sumala sa mga resulta sa ORF1ab, N gene ug E gene, interpretasyon sama sa mosunod:
1) Kung DUHA o TULO ka mga gene sa namatikdan nga mga gene positibo, ang 2019-nCoV positibo;
2) Kung ISA LANG o WALA sa mga nakitang gene ang positibo, negatibo ang 2019-nCoV.
Mubo nga sulat: Ang amplification curve sa positibo nga sample kinahanglan nga adunay tipikal nga S curve.Bisan pa, kung ang target nga konsentrasyon labi ka taas, ang internal nga standard nga kontrol mahimo’g dili mapadako ug ang sample mahimong direktang hukman nga positibo.Kung adunay duha sa mga target nga gene nga makakuha og Ct≤38, positibo ang 2019-nCoV.Kung adunay duha sa mga target nga gene nga makakuha og Ct≥40, negatibo ang 2019-nCoV.Kung ang Ct≥40, o wala’y gipakita nga kantidad, negatibo ang interpretasyon sa mga resulta sa target nga gene.
3. Kung ang tanan nga Ct value sa FAM, VIC, ROX ug Cy5 nga mga channel labaw sa 38 o walay klaro nga tipikal nga S amplification curve:
1) Adunay (mga) substansiya sa sample nga makapugong sa reaksyon sa PCR.Girekomenda nga tunawon ang sample aron masulayan pag-usab.
2) Ang proseso sa pagkuha sa nucleic acid dili normal, mao nga gisugyot nga i-re-extract
nucleic acid alang sa re-test.
3) Kini nga sample DILI usa ka kwalipikado nga sample sa panahon sa sampling, o degraded
sa panahon sa transportasyon ug pagtipig.
Kini ang 2 nga mga paagi aron mahibal-an naton kini nga mga sitwasyon: NAAT ug Antigen.
(Gikan sa CDC sa Los Angeles)
