Produkta Detalo
La Monda Organizo pri Sano (OMS) gvidas, ke antigen-detektaj rapidaj diagnozaj testoj (Ag-RDRs) povas oferti pli rapidan kaj malpli multekostan manieron diagnozi aktivan SARS-CoV-2-infekton ol testoj por plifortigo de nukleaj acidoj (NAATs), kaj WHO ankaŭ rekomendas. ke Ag-RDTs renkontantaj minimumajn spektaklopostulojn povas esti uzitaj por primara kazdetekto, kontaktpaŭsaĵo, dum ekapero-enketoj kaj por monitori tendencojn de malsanincidenco en komunumoj.
Trajtoj
● Ampleksa:Tri celgeno detektas en unu testo
● kongrua:Adapta al komuna ekipaĵo kun kanaloj CY5, FAM, VIC/HEX.
● Bonega agado:Alta sentemo kaj specifeco, LOD = 200 kopioj/ml.
Teknika Parametro
| Paka Specifo | 50 testoj/ilaro, 100 testoj/ilaro |
| Cela Regiono | ORF1ab, N, E |
| Aplika Specimeno | Sputo, Orofaringea Swab |
| Limo de Detekto | 200 ekzempleroj/ml |
| Totala Koincido-Indico | 99,55 % |
| Ct-valoro (CV,%) | ≤5.0% |
| Pozitiva Koincido-Indico | 99,12 % |
| Negativa Koincido-Indico | 100% |
| Kondiĉoj de Stokado kaj Eksvalidiĝo | Stokita je -20±5℃, kaj validas provizore dum 12 monatoj. |
| Interna Kontrolo | Jes |
| Katalogo-Numero | A7793YF-50T, A7793YF-100T |
| Atestado | CE |
| Specimenoj | Nazofaringa lavaĵo, Orofaringea lavaĵo, Alveolara lavlikvaĵo, Salivo kaj sputo |
| Aplika Instrumento | ABI 7500, Roche Light Cycler 480Ⅱ , Roche Cobas z 480, SLAN-96P Real-Time PCR System |
Proceduro
1. Nuklea Acida Eltiro
Operacio devas esti farita laŭ la manlibro de eltira ilaro.
2. Sistempreparo:
1) Elprenu la reakciilon kaj degelu la reakciilon tute.Inversu la miksaĵon kaj centrifugu tuj.N testaj reagoj (N = nombro da testendaj specimenoj + pozitiva kontrolo + negativa kontrolo + 1) estas pretaj por reagsistemoj, respektive, jene.
| Vomponentss | Volumo por 1 reagsistemo | Volumo por N reagsistemo |
| Miksaĵo de solvaĵo por plifortiga reakcio de nuklea acido (A7793YF) | 18 µL | 18 µL * N |
| Enzima miksaĵo | 2 µL | 2 µL * N |
| Totala volumo | 20 µL | 20 µL * N |
2) Reakcia distribuo: La reakcia solvo estis miksita kaj centrifugata, kaj ĉiu tubo estis disigita en kvanto de 20μL en PCR-tubo taŭga por fluoreskeca PCR-aparato.
3. Ŝargado
5μL de la ĉerpita specimena nuklea acido, pozitiva kontrolo nuklea acido kaj negativa kontrolo nuklea acido estas aldonitaj al la reakciaj sistemoj, kaj la totala reakcia volumo estas 25μL.Fiksu la tubkovrilon kaj movu ĝin al la plifortiga testa areo post kelkaj sekundoj de centrifugado.
4. PCR-Amplifiga Testo
1) Metu la PCR-reagan tubon en la fluoreskan PCR-amplifilon por plifortiga detekto.
2) Cikla parametro agordo:
| Programo | Nombro de cikloj | Temperaturo | Tempo de reago | |
| 1 | 1 | 50℃ | 10 min | |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 sek | |
| 3 | 45 | 95℃ | 5 sek | |
| 60℃ | 30 sek | Fluoreska Kolekto | ||
3) Detektaj agordoj:
La detektkanaloj estas fiksitaj al FAM, VIC, ROX kaj CY5, egalrilatante al ORF1ab, N-geno, kaj E-geno, RNase P interna kontrolo, respektive."Quencher Dye" kaj "Pasiva Referenco" estas agordita al "Neniu" por la ABI 7500-instrumento.Agordu la Pozitivan Kontrolon, Negativan Kontrolon kaj Specimon (Nekonata) en ordo, en kiu la specimenoj kongruas, kaj agordu la specimenan nomon en la kolumno "Sample Name".
Por X-POCH16, la operacio kaj programo estas kiel sekvas:
1) Post kiam la memtesto estas kompleta, malfermu la kovrilon kaj metu la PCR-reagajn tubojn en la difinitajn poziciojn en la instrumento.
2) Komencu elektante la "Esperanto."opcio.Elektu la opcion "Ĉiuj" aŭ mane elektu la reago-areon sur la maldekstra flanko de la ekrano.
3) Elektu la opcion "ŜARĜI";elektu la testprogramon;alklaku "FINITAS" kaj la "RUN".La programo daŭras 30min42s por kompletigi.
La detektokanaloj de la Defaŭlta programo estas fiksitaj al FAM, VIC, ROX kaj CY5, egalrilatante al ORF1ab, N-geno, kaj E Gene, RNase P interna kontrolo, respektive.
La cikla parametro de la Defaŭlta programo estas kiel sekvas:
| Programo | Nombro de | Temperaturo | Tempo de reago |
| 1 | 1 | 50℃ | 2 min |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 sek |
| 3 | 41 | 95℃ | 2 sek |
| 60℃ | 13 sek | Fluoresko |
5. Sojla Agordo
Laŭ la analizita bildo, ĝustigu la Komencan valoron, Finan valoron de Bazlinio kaj Sojlan valoron (Komenca valoro kaj finvaloro rekomendas esti agordi 3 kaj 15 respektive, kaj la plifortiga kurbo de la negativa kontrolo estas ĝustigita por esti plata aŭ pli malalta ol la sojla Linio), alklaku Analizon por aŭtomate ricevi la analizon la specimenan Ct-valoron.Rigardu la rezultojn en la Raporta interfaco.
6. Kvalita Kontrola Normo
Ĉiu kontrolo de la ilaro devas plenumi la sekvajn postulojn kun 'S'-kurbo, alie la eksperimento estas malvalida.
| Detektaj kanaloj | Negativa kontrolo | Pozitiva kontrolo |
| FAM(ORF1ab) | Neniu Ct | Ct≤38 |
| VIC(N) | Neniu Ct | Ct≤38 |
| ROX(E) | Neniu Ct | Ct≤38 |
| CY5(RP) | Neniu Ct | Ct≤38 |
【Limvaloro】
Laŭ la rezultoj de 100 orofaringaj swabprovaĵoj kaj 100 sputospecimenoj, kaj kun la ROC-kurba metodo, la Cut-off valoro de la OFR1ab, N-genoj E Geno de ĉi tiu ilaro estas Ct = 38
Oftaj Demandoj
En ĉi tiu ilaro, enkondukoj kaj sondiloj de realtempa fluoreska PCR-teknologio estas desegnitaj al la konservitaj kaj specifaj regionoj de la geno ORF1ab, N kaj E de 2019-nCoV respektive.Dum PCR-plifortigo, la enketo ligas al la ŝablono, kaj la 5'-fina raportistogrupo de la enketo estas fendita per la Taq-enzimo (5'→3' eksonukleaza agado), tiel moviĝante foren de la estinga grupo por generi fluoreskan signalon. .La realtempa plifortiga kurbo estas aŭtomate bildigita surbaze de la detektita fluoreskeca signalo, kaj la specimena Ct-valoro estas kalkulita.FAM, VIC kaj ROX-fluoroforoj estas etikeditaj al ORF1ab-geno, N-geno kaj E-genenketoj.Uzante unu teston, kvalita detekto de ĉi-supraj tri genoj de 2019-nCoV povas esti farita samtempe.
La ilaro estas provizita per interna kontrolo celanta la RNase P-genon por kontroli klinikajn specimenojn kolekton, manipuladon, eltiron kaj RT-PCR-procezon por eviti malverajn negativajn rezultojn.La interna kontrolo estas etikedita kun CY5-fluoreska grupo.
1. Analizu kaj interpretu testrezultojn kiam la instrumento estas normala, kaj la pozitiva kontrolo, la negativa kontrolo kaj la interna kontrolo-testrezulto plenumas la normon de kvalito-kontrolo.
2. La plifortiga kurbo de interna kontrolo (CY5) montras tipan S-kurbon kaj Ct ≤ 38, lego la rezultoj de celaj genoj estas submetitaj al la sekvaj kondiĉoj.
| Detektaj kanaloj | Interpreto de la rezultoj de celgenoj | ||
| FMA | VIC (N geno) | ROX (E-geno) | |
| Ct≤38 | Ct≤38 | Ct≤38 | Kun tipa S-amplifiga kurbo, la Ct-valoro estas ≤38, la responda celgeno estas pozitiva. |
| 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | Kun tipa S-amplifiga kurbo, denove testi la respondan celgenon de la specimeno. Se la Ct-valoro＜ 40 kun tipa S-amplifiga kurbo, la responda celgeno estas pozitiva;se la Ct-valoro≥40, la responda celgeno estas negativa |
| Ct≥40 | Ct≥40 | Ct≥40 | La ekvivalenta celgeno estas negativa |
Interpreto de rezultoj por 2019-nCoV:
Laŭ la rezultoj de ORF1ab, N-geno kaj E-geno, interpreto jene:
1) Se DU aŭ TRI genoj de la detektitaj genoj estas pozitivaj, la 2019-nCoV estas pozitiva;
2) Se NUR UNU aŭ NENINU el la detektitaj genoj estas pozitiva, la 2019-nCoV estas negativa.
Notu: La plifortiga kurbo de la pozitiva specimeno devus esti kun tipa S-kurbo.Tamen, se la celkoncentriĝo estas tro alta, la interna norma kontrolo eble ne estas plifortigita kaj la provaĵo povas esti rekte taksita kiel pozitiva.Se iuj du el celgenoj ricevas Ct≤38, la 2019-nCoV estas pozitiva.Se iuj du el celgenoj ricevas Ct≥40, la 2019-nCoV estas negativa.Se Ct≥40, aŭ montras neniun valoron, interpreto la rezultoj de celgeno estas negativaj.
3. Se ĉiuj Ct-valoroj de FAM, VIC, ROX kaj Cy5-kanaloj estas pli ol 38 aŭ ne estas evidenta tipa S-amplifiga kurbo:
1) Estas/estas substanco(j) en la specimeno, kiuj malhelpas la PCR-reagon.Oni rekomendas dilui la specimenon por esti retestita.
2) La procezo de eltiro de nuklea acido estas nenormala, do oni sugestas re-eltiri
nuklea acido por re-testo.
3) Ĉi tiu specimeno NE estis kvalifikita specimeno en la momento de specimenigo, aŭ degradita
dum transportado kaj stokado.
Ili estas 2 manieroj kiel ni povas detekti ĉi tiujn situaciojn: NAAT kaj Antigeno.
(Venas de CDC de Los-Anĝeleso)
