Tuotetiedot
Maailman terveysjärjestö (WHO) opastaa, että antigeenien havaitsevat pikadiagnostiset testit (Ag-RDR) voivat tarjota nopeamman ja halvemman tavan diagnosoida aktiivinen SARS-CoV-2-infektio kuin nukleiinihappoamplifikaatiotestit (NAAT), ja WHO suosittelee myös että vähimmäissuorituskykyvaatimukset täyttäviä Ag-RDT:itä voidaan käyttää ensisijaisiin tapausten havaitsemiseen, kontaktien jäljittämiseen, taudinpurkaustutkimuksiin ja tautien esiintymistrendien seuraamiseen yhteisöissä.
ominaisuudet
● Kattava:Yhdessä testissä havaitaan kolme kohdegeeniä
● yhteensopiva:Mukautuva yleisiin laitteisiin, joissa on CY5-, FAM-, VIC/HEX-kanavat.
● Erinomainen suorituskyky:Suuri herkkyys ja spesifisyys, LOD = 200 kopiota/ml.
Tekninen parametri
| Pakkaustiedot | 50 testiä/sarja, 100 testiä/sarja |
| Kohdealue | ORF1ab, N, E |
| Sovellettava näyte | Yskös, suunielun vanupuikko |
| Havaintoraja | 200 kpl/ml |
| Kokonaissattumaprosentti | 99,55 % |
| Ct-arvo (CV, %) | ≤5,0 % |
| Positiivinen sattumaprosentti | 99,12 % |
| Negatiivinen sattumaprosentti | 100 % |
| Varastointiolosuhteet ja viimeinen voimassaolopäivä | Säilytetty -20±5 ℃:ssa ja on voimassa väliaikaisesti 12 kuukautta. |
| Sisäinen kontrolli | Joo |
| Kataloginumero | A7793YF-50T, A7793YF-100T |
| Sertifiointi | CE |
| Yksilöt | Nenänielun vanupuikko, suunielun vanupuikko, alveolaarinen huuhteluneste, sylki ja yskös |
| Sovellettava instrumentti | ABI 7500, Roche Light Cycler 480Ⅱ, Roche Cobas z 480, SLAN-96P reaaliaikainen PCR-järjestelmä |
TESTAUSMENETTELY
1. Nukleiinihappouutto
Käyttö tulee suorittaa poistosarjan ohjekirjan mukaisesti.
2. Järjestelmän valmistelu:
1) Ota reagenssi pois ja sulata reagenssi kokonaan.Käännä seos ylösalaisin ja sentrifugoi välittömästi.N testireaktiota (N = testattavien näytteiden lukumäärä + positiivinen kontrolli + negatiivinen kontrolli + 1) valmistetaan reaktiojärjestelmille, vastaavasti, seuraavasti.
| Vomponentss | Tilavuus 1 reaktiojärjestelmälle | N-reaktiojärjestelmän tilavuus |
| Nukleiinihapon monistusreaktioliuoksen sekoitus (A7793YF) | 18 µl | 18 µl * N |
| Entsyymi seos | 2 µl | 2 µl * N |
| Kokonaistilavuus | 20 µl | 20 µl * N |
2) Reaktion jakautuminen: Reaktioliuos sekoitettiin ja sentrifugoitiin, ja jokaista putkea annosteltiin 20 µl:n määrä PCR-putkeen, joka soveltuu fluoresenssi-PCR-laitteeseen.
3. Ladataan
5 µl uutettua näytenukleiinihappoa, positiivista kontrollinukleiinihappoa ja negatiivista kontrollinukleiinihappoa lisätään reaktiojärjestelmiin, ja kokonaisreaktiotilavuus on 25 µl.Kiinnitä putken kansi ja siirrä se amplifikaatiotestialueelle muutaman sekunnin sentrifugoinnin jälkeen.
4. PCR-amplifikaatiomääritys
1) Aseta PCR-reaktioputki fluoresoivaan PCR-amplifikaatioinstrumenttiin vahvistuksen havaitsemista varten.
2) Jakson parametrien asetus:
| Ohjelmoida | Jaksojen lukumäärä | Lämpötila | Reaktioaika | |
| 1 | 1 | 50℃ | 10 min | |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 sek | |
| 3 | 45 | 95℃ | 5 sek | |
| 60℃ | 30 sek | Fluoresenssikokoelma | ||
3) Tunnistusasetukset:
Havaitsemiskanavat on asetettu FAM-, VIC-, ROX- ja CY5-arvoihin, jotka vastaavat ORF1ab:n, N-geenin ja E-geenin, RNaasi P:n sisäistä kontrollia, vastaavasti."Quencher Dye" ja "Passive Reference" on asetettu arvoon "Ei mitään" ABI 7500 -instrumentille.Aseta positiivinen kontrolli, negatiivinen kontrolli ja näyte (tuntematon) järjestykseen, jossa näytteet vastaavat, ja aseta näytteen nimi "Sample Name" -sarakkeeseen.
X-POCH16:n toiminta ja ohjelma ovat seuraavat:
1) Kun itsetesti on valmis, avaa kansi ja aseta PCR-reaktioputket niille tarkoitettuihin kohtiin instrumentissa.
2) Aloita valitsemalla "Exper".vaihtoehto.Valitse "Kaikki" -vaihtoehto tai valitse manuaalisesti reaktioalue näytön vasemmasta reunasta.
3) Valitse "LOAD"-vaihtoehto;valitse testiohjelma;napsauta "VALMIS" ja "RUN".Ohjelman suorittaminen kestää 30min42s.
Oletusohjelman tunnistuskanavat ovat FAM, VIC, ROX ja CY5, jotka vastaavat ORF1ab, N-geeni ja E-geeni, RNase P:n sisäinen kontrolli, vastaavasti.
Oletusohjelman sykliparametrit ovat seuraavat:
| Ohjelmoida | Lukumäärä | Lämpötila | Reaktioaika |
| 1 | 1 | 50℃ | 2 min |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 sekuntia |
| 3 | 41 | 95℃ | 2 s |
| 60℃ | 13 sek | Fluoresenssi |
5. Kynnysasetus
Säädä analysoidun kuvan mukaan aloitusarvoa, perusviivan loppuarvoa ja kynnysarvoa (aloitusarvoksi suositellaan 3 ja loppuarvoksi 15, ja negatiivisen kontrollin vahvistuskäyrä säädetään tasaiseksi tai pienempi kuin kynnysrivi), napsauta Analyysi saadaksesi analyysin automaattisesti näytteen Ct-arvon.Katso tulokset Raportti-käyttöliittymässä.
6. Laadunvalvontastandardi
Jokaisen sarjan kontrollin on täytettävä seuraavat S-käyrän vaatimukset, muuten koe on virheellinen.
| Tunnistuskanavat | Negatiivinen kontrolli | Positiivinen ohjaus |
| FAM (ORF1ab) | Ei Ct | Ct≤38 |
| VIC(N) | Ei Ct | Ct≤38 |
| ROX(E) | Ei Ct | Ct≤38 |
| CY5(RP) | Ei Ct | Ct≤38 |
【Rajausarvo】
100 suunielun vanupuikkonäytteen ja 100 yskösnäytteen tulosten ja ROC-käyrämenetelmän mukaan tämän sarjan OFR1ab, N-geenien E-geenin raja-arvo on Ct = 38
FAQ
Tässä sarjassa reaaliaikaisen fluoresoivan PCR-tekniikan alukkeet ja koettimet on suunniteltu 2019-nCoV:n ORF1ab-, N- ja E-geenin konservoituneille ja spesifisille alueille.PCR-monistuksen aikana koetin sitoutuu templaattiin ja Taq-entsyymi pilkkoo koettimen 5'-pään reportteriryhmän (5'→3'-eksonukleaasiaktiivisuus), jolloin se siirtyy pois sammutusryhmästä fluoresoivan signaalin muodostamiseksi. .Reaaliaikainen vahvistuskäyrä piirretään automaattisesti havaitun fluoresenssisignaalin perusteella, ja näytteen Ct-arvo lasketaan.FAM-, VIC- ja ROX-fluoroforit on leimattu ORF1ab-geenin, N-geenin ja E-geenin koettimiin.Yhtä testiä käyttämällä voidaan suorittaa kvalitatiivinen havaitseminen edellä mainituista kolmesta 2019-nCoV:n geenistä samanaikaisesti.
Pakkaus sisältää sisäisen kontrollin, joka kohdistuu RNaasi P -geeniin kliinisten näytteiden keräämisen, käsittelyn, uuttamisen ja RT-PCR-prosessin seuraamiseksi väärien negatiivisten tulosten välttämiseksi.Sisäinen kontrolli on leimattu CY5-fluoresoivalla ryhmällä.
1. Analysoi ja tulkitse testituloksia, kun laite on normaali ja positiivinen kontrolli, negatiivinen kontrolli ja sisäisen kontrollin testitulos täyttävät laadunvalvontastandardin.
2. Sisäisen kontrollin monistuskäyrä (CY5) näyttää tyypillisen S-käyrän ja Ct ≤ 38, tulkinta kohdegeenien tuloksista alistetaan seuraaville olosuhteille.
| Tunnistuskanavat | Kohdegeenien tulosten tulkinta | ||
| FMA | VIC (N-geeni) | ROX (E-geeni) | |
| Ct≤38 | Ct≤38 | Ct≤38 | Tyypillisellä S-monistuskäyrällä Ct-arvo on ≤38, vastaava kohdegeeni on positiivinen. |
| 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | Testaa näytteen vastaava kohdegeeni uudelleen tyypillisellä S-monistuskäyrällä. Jos Ct-arvo ＜ 40 tyypillisellä S-monistuskäyrällä, vastaava kohdegeeni on positiivinen;jos Ct-arvo ≥40, vastaava kohdegeeni on negatiivinen |
| Ct≥40 | Ct≥40 | Ct≥40 | Vastaava kohdegeeni on negatiivinen |
Tulkinta 2019-nCoV:lle:
ORF1ab:n, N-geenin ja E-geenin tulosten mukaan tulkinta seuraavasti:
1) Jos KAKSI tai KOLME geeniä havaituista geeneistä ovat positiivisia, 2019-nCoV on positiivinen;
2) Jos VAIN YKSI tai MITÄÄN havaituista geeneistä on positiivinen, 2019-nCoV on negatiivinen.
Huomautus: Positiivisen näytteen vahvistuskäyrän tulee olla tyypillisen S-käyrän kanssa.Jos tavoitekonsentraatio on kuitenkin liian korkea, sisäistä standardikontrollia ei ehkä voida monistaa ja näyte voidaan suoraan arvioida positiiviseksi.Jos jompikumpi kahdesta kohdegeenistä saa Ct≤38:n, 2019-nCoV on positiivinen.Jos jompikumpi kahdesta kohdegeenistä saa Ct≥40:n, 2019-nCoV on negatiivinen.Jos Ct≥40 tai ei näy mitään arvoa, tulkinta kohdegeenin tulos on negatiivinen.
3. Jos kaikki FAM-, VIC-, ROX- ja Cy5-kanavien Ct-arvot ovat yli 38 tai tyypillistä S-vahvistuskäyrää ei ole:
1) Näytteessä on ainetta/aineita, jotka estävät PCR-reaktion.On suositeltavaa laimentaa näyte uudelleen testattavaa varten.
2) Nukleiinihapon uuttoprosessi on epänormaali, joten on ehdotettu uuttamista
nukleiinihappo uusintatestiä varten.
3) Tämä näyte EI ollut hyväksytty näyte näytteenottohetkellä tai se oli huonontunut
kuljetuksen ja varastoinnin aikana.
Ne ovat kaksi tapaa havaita nämä tilanteet: NAAT ja Antigen.
(Tulee Los Angelesin CDC:ltä)
