Produkt Detail
De Wrâldsûnensorganisaasje (WHO) begeliedt dat antigeen-detektearjende rappe diagnostyske tests (Ag-RDR's) in rappere en minder djoere manier kinne biede om aktive SARS-CoV-2-ynfeksje te diagnostearjen dan nukleïnezuur-amplifikaasjetests (NAAT's), en de WHO advisearret ek dat Ag-RDT's dy't oan minimale prestaasjeseasken foldwaan kinne wurde brûkt foar primêr gefaldeteksje, kontaktopsporing, tidens útbraakûndersiken en om trends fan sykteynfal yn mienskippen te kontrolearjen.
Features
● Wiidweidich:Trije doelgenen detektearje yn ien test
● kompatibel:Oanpasber foar mienskiplike apparatuer mei CY5, FAM, VIC / HEX-kanalen.
● Prachtige prestaasjes:Hege gefoelichheid en spesifisiteit, LOD = 200 eksimplaren / ml.
Technyske parameter
| Packing Spesifikaasje | 50 tests / kit, 100 tests / kit |
| Doelgebiet | ORF1ab, N, E |
| Tapasbere Sample | Sputum, Orofaryngeal Swab |
| Limit of Detection | 200 eksimplaren/ml |
| Totaal tafal Rate | 99.55% |
| Ct wearde (CV,%) | ≤5,0% |
| Posityf tafal Rate | 99.12% |
| Negatyf tafal Rate | 100% |
| Opslach Betingsten en ferfaldatum | Opslein by -20 ± 5 ℃, en is jildich foar foarriedich foar 12 moannen. |
| Ynterne kontrôle | Ja |
| Katalogusnûmer | A7793YF-50T, A7793YF-100T |
| Sertifisearring | CE |
| Eksimplaren | Nasopharyngeal swab, Orofaryngeal swab, Alveolêre lavage fluid, speeksel en sputum |
| Tapasbere ynstrumint | ABI 7500, Roche Light Cycler 480Ⅱ , Roche Cobas z 480, SLAN-96P Real-Time PCR System |
Test proseduere
1. Nucleic Acid Extraction
Operaasje moat wurde útfierd neffens de hantlieding fan ekstraksje kit.
2. Systeemtarieding:
1) Nim it reagens út en ûntdooi it reagens folslein.Invert it mingsel en centrifuge fuortendaliks.N testreaksjes (N = oantal te testen samples + positive kontrôle + negative kontrôle + 1) wurde taret foar respektivelik reaksjesystemen as folget.
| Voponentss | Folume foar 1 reaksje systeem | Folume foar N reaksje systeem |
| Nucleic acid amplification reaksje oplossing Mix (A7793YF) | 18 µL | 18 µL * N |
| Enzym mingsel | 2 µl | 2 µL * N |
| Totale folume | 20 µL | 20 µL * N |
2) Reaksje distribúsje: De reaksje oplossing waard mingd en centrifuged, en elke buis waard dispensed yn in bedrach fan 20μL yn in PCR buis geskikt foar in fluorescence PCR apparaat.
3. Loading
5μL fan it extracted sample nucleic acid, positive kontrôle nucleic acid en negative kontrôle nucleic acid wurde tafoege oan de reaksje systemen, en it totale reaksje folume is 25μL.Befestigje it buisdeksel en ferpleats it nei it amplifikaasjetestgebiet nei in pear sekonden fan sintrifugering.
4. PCR Amplification Assay
1) Set de PCR-reaksjebuis yn it fluorescent PCR-amplifikaasjeynstrumint foar amplifikaasjedeteksje.
2) Cycle parameter ynstelling:
| Programma | Oantal syklusen | Temperatuer | Réaksjetiid | |
| 1 | 1 | 50 ℃ | 10 min | |
| 2 | 1 | 95 ℃ | 30 sek | |
| 3 | 45 | 95 ℃ | 5 sek | |
| 60℃ | 30 sek | Fluorescence Kolleksje | ||
3) Deteksjeynstellingen:
De deteksjekanalen binne ynsteld op FAM, VIC, ROX en CY5, oerienkommende respektivelik mei ORF1ab, N-gen, en E Gene, RNase P ynterne kontrôle."Quencher Dye" en "Passive Reference" binne ynsteld op "Gjin" foar it ABI 7500-ynstrumint.Stel de Positive Control, Negative Control, en Sample (Unbekend) yn yn folchoarder wêryn't de samples oerienkomme, en set de samplenamme yn 'e kolom "Sample Name" yn.
Foar X-POCH16 binne de operaasje en programma as folgjend:
1) Nei't de selstest foltôge is, iepenje it lid en set de PCR-reaksjebuizen yn 'e oanwiisde posysjes yn it ynstrumint.
2) Begjin mei it selektearjen fan de "Exper."opsje.Selektearje de opsje "Alles" of selektearje manuell it reaksjegebiet oan de linkerkant fan it skerm.
3) Selektearje de "LOAD" opsje;selektearje it testprogramma;klik op "DONE" en de "RUN".It programma duorret 30min42s om te foltôgjen.
De deteksjekanalen fan it Standertprogramma binne ynsteld op FAM, VIC, ROX en CY5, oerienkommende respektivelik mei ORF1ab, N-gen, en E Gene, RNase P ynterne kontrôle.
De syklusparameter fan it Standertprogramma binne as folget:
| Programma | Oantal | Temperatuer | Réaksjetiid |
| 1 | 1 | 50 ℃ | 2 min |
| 2 | 1 | 95 ℃ | 30 sek |
| 3 | 41 | 95 ℃ | 2 sek |
| 60℃ | 13 sek | Fluorescence |
5. Threshold Setting
Pas neffens de analysearre ôfbylding de Startwearde, Einwearde fan Baseline en Thresholdwearde oan (Startwearde en einwearde wurdt oanrikkemandearre om ynsteld te wêzen op respektivelik 3 en 15, en de amplifikaasjekromme fan 'e negative kontrôle wurdt oanpast om flak of te wêzen leger as de drompelline), klikje op Analyse om automatysk de analyse de sample Ct-wearde te krijen.Besjoch de resultaten yn 'e Meldynterface.
6. Quality Control Standert
Elke kontrôle fan 'e kit moat de folgjende easken foldwaan mei 'S'-kromme, oars is it eksperimint ûnjildich.
| Detection kanalen | Negatyf kontrôle | Posityf kontrôle |
| FAM(ORF1ab) | Nei Ct | Ct≤38 |
| VIC(N) | Nei Ct | Ct≤38 |
| ROX(E) | Nei Ct | Ct≤38 |
| CY5(RP) | Nei Ct | Ct≤38 |
【Snijwearde】
Neffens de resultaten fan 100 orofaryngeale swab-monsters en 100 sputummonsters, en mei de ROC-kurvemetoade, binne de Cut-off-wearde fan 'e OFR1ab, N-genen E Gene fan dizze kit Ct = 38
FAQ
Yn dizze kit binne primers en probes fan real-time fluorescent PCR-technology ûntworpen foar de bewarre en spesifike regio's fan it ORF1ab, N en E gen fan respektivelik 2019-nCoV.Tidens PCR-amplifikaasje bynt de sonde oan it sjabloan, en de 5'-ein-reportergroep fan 'e sonde wurdt spjalte troch it Taq-enzyme (5'→3'-eksonuklease-aktiviteit), en ferpleatst dêrmei fuort fan 'e quenching-groep om in fluorescent sinjaal te generearjen .De real-time amplifikaasjekromme wurdt automatysk útset op basis fan it ûntdutsen fluoreszenssinjaal, en de sample Ct-wearde wurdt berekkene.FAM-, VIC- en ROX-fluorofoaren wurde markearre oan ORF1ab-gen, N-gen en E-genprobes.Troch ien test te brûken, kin kwalitative deteksje fan 'e boppesteande trije genen fan 2019-nCoV tagelyk wurde útfierd.
De kit is foarsjoen fan in ynterne kontrôle dy't rjochte is op it RNase P-gen om klinyske samples te sammeljen, ôfhanneljen, ekstraksje en RT-PCR-proses te kontrolearjen om falsk-negative resultaten te foarkommen.De ynterne kontrôle is markearre mei in CY5 fluorescent groep.
1. Analysearje en ynterpretearje testresultaten as it ynstrumint normaal is, en de positive kontrôle, de negative kontrôle en it testresultaat foar ynterne kontrôle foldogge oan de kwaliteitskontrôlestandert.
2. De amplifikaasjekromme fan ynterne kontrôle (CY5) toant in typyske S-kromme en Ct ≤ 38, ynterpretaasje fan 'e resultaten fan doelgenen wurdt ûnderwurpen oan de folgjende betingsten.
| Detection kanalen | Ynterpretaasje fan de resultaten fan doelgenen | ||
| FMA | VIC (N gen) | ROX (E gen) | |
| Ct≤38 | Ct≤38 | Ct≤38 | Mei in typyske S-amplifikaasjekromme is de Ct-wearde ≤38, it oerienkommende doelgen is posityf. |
| 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | Mei in typyske S-amplifikaasjekromme, test it korrespondearjende doelgen fan 'e stekproef opnij. As de Ct-wearde ＜ 40 mei in typyske S-amplifikaasjekromme, is it korrespondearjende doelgen posityf;as de Ct-wearde ≥40, is it korrespondearjende doelgen negatyf |
| Ct≥40 | Ct≥40 | Ct≥40 | It oerienkommende doelgen is negatyf |
Ynterpretaasje fan resultaten foar 2019-nCoV:
Neffens de resultaten fan ORF1ab, N-gen en E-gen, ynterpretaasje as folget:
1) As TWEE of TRIJE genen fan 'e ûntdutsen genen posityf binne, is de 2019-nCoV posityf;
2) As ALLEEN IEN as GEEN fan 'e ûntdutsen genen posityf is, is de 2019-nCoV negatyf.
Opmerking: De amplifikaasjekromme fan it positive monster moat wêze mei in typyske S-kromme.As de doelkonsintraasje lykwols te heech is, kin de ynterne standertkontrôle miskien net wurde fersterke en kin it stekproef direkt as posityf beoardiele wurde.As ien fan twa fan doelgenen Ct≤38 krije, is de 2019-nCoV posityf.As ien fan twa doelgenen Ct≥40 krije, is de 2019-nCoV negatyf.As Ct≥40, of toant gjin wearde, ynterpretaasje de resultaten fan doelgen is negatyf.
3. As alle Ct-wearden fan FAM-, VIC-, ROX- en Cy5-kanalen mear binne dan 38 of d'r is gjin dúdlike typyske S-amplifikaasjekromme:
1) D'r binne substans(en) yn 'e stekproef dy't de PCR-reaksje remme.It is oan te rieden om it monster te verdunnen foar opnij testen.
2) It proses fan ekstraksje fan nukleïnesäure is abnormaal, dus it wurdt suggerearre om opnij te ekstrahearjen
nucleic acid foar re-test.
3) Dit stekproef wie NET in kwalifisearre stekproef op it momint fan sampling, of degradearre
tidens ferfier en opslach.
Se binne 2 manieren wêrop wy dizze situaasjes kinne ûntdekke: NAAT en antigeen.
(Komt fan CDC fan Los Angeles)
