Ապրանքի մանրամասն
Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպությունը (ԱՀԿ) առաջնորդում է, որ անտիգեն հայտնաբերող արագ ախտորոշիչ թեստերը (Ag-RDRs) կարող են առաջարկել ակտիվ SARS-CoV-2 վարակի ախտորոշման ավելի արագ և էժան միջոց, քան նուկլեինաթթվի ուժեղացման թեստերը (NAATs), և ԱՀԿ-ն նաև առաջարկում է. որ Ag-RDT-ները, որոնք բավարարում են կատարողականի նվազագույն պահանջները, կարող են օգտագործվել դեպքերի առաջնային հայտնաբերման, կոնտակտների հետագծման, բռնկման հետաքննության ընթացքում և համայնքներում հիվանդությունների տարածման միտումները վերահսկելու համար:
Հատկություններ
● Համապարփակ.Մեկ թեստի ընթացքում հայտնաբերվում է երեք թիրախային գեն
● համատեղելի՝Հարմարվող ընդհանուր սարքավորումների հետ CY5, FAM, VIC/HEX ալիքներով:
● Գերազանց կատարում.Բարձր զգայունություն և առանձնահատկություն, LOD = 200 օրինակ/մլ:
Տեխնիկական պարամետր
| Փաթեթավորման Տեխնիկական | 50 թեստ / հավաքածու, 100 թեստ / փաթեթ |
| Թիրախային շրջան | ORF1ab, N, E |
| Կիրառելի նմուշ | Խորխ, օրոֆարինգիալ շվաբր |
| Հայտնաբերման սահմանը | 200 օրինակ/մլ |
| Ընդհանուր համընկնման տոկոսադրույքը | 99,55% |
| Ct արժեքը (CV,%) | ≤5,0% |
| Դրական համընկնման դրույքաչափ | 99.12% |
| Բացասական համընկնման դրույքաչափ | 100% |
| Պահպանման պայմանները և պիտանելիության ժամկետը | Պահպանվում է -20±5℃ ջերմաստիճանում և գործում է ժամանակավորապես 12 ամիս: |
| Ներքին հսկողություն | Այո՛ |
| Կատալոգի համարը | A7793YF-50T, A7793YF-100T |
| Հավաստագրում | CE |
| Նմուշներ | Քթի խոռոչի շվաբր, օրոֆարինգային շվաբր, ալվեոլային լվացման հեղուկ, թուք և խորք |
| Կիրառելի գործիք | ABI 7500, Roche Light Cycler 480Ⅱ, Roche Cobas z 480, SLAN-96P իրական ժամանակի PCR համակարգ |
Փորձարկման ընթացակարգ
1. Նուկլեինաթթվի արդյունահանում
Գործողությունը պետք է իրականացվի արդյունահանման հավաքածուի ձեռնարկի համաձայն:
2. Համակարգի պատրաստում.
1) հանել ռեակտիվը և ամբողջությամբ հալեցնել ռեագենտը:Խառնուրդը շրջեք և անմիջապես ցենտրիֆուգեք:N փորձարկման ռեակցիաներ (N = փորձարկվող նմուշների քանակը + դրական հսկողություն + բացասական հսկողություն + 1) պատրաստվում են ռեակցիայի համակարգերի համար, համապատասխանաբար, հետևյալ կերպ.
| Vomponentss | Ծավալը 1 ռեակցիայի համակարգի համար | Ծավալը N ռեակցիայի համակարգի համար |
| Նուկլեինաթթվի ուժեղացման ռեակցիայի խառնուրդ (A7793YF) | 18 մլ | 18 µL * N |
| Ֆերմենտային խառնուրդ | 2 մկլ | 2 μL * N |
| Ընդհանուր ծավալը | 20 մլ | 20 μL * N |
2) Ռեակցիայի բաշխում. Ռեակցիայի լուծույթը խառնվել և ցենտրիֆուգվել է, և յուրաքանչյուր խողովակ 20 μL քանակով բաժանվել է PCR խողովակի մեջ, որը հարմար է ֆլուորեսցենտային PCR սարքի համար:
3. Բեռնում
Արդյունահանված նմուշի 5 մկլ նուկլեինաթթու, դրական հսկողության նուկլեինաթթու և բացասական հսկողության նուկլեինաթթու ավելացվում են ռեակցիայի համակարգերին, իսկ ռեակցիայի ընդհանուր ծավալը կազմում է 25 μL:Ամրացրեք խողովակի կափարիչը և մի քանի վայրկյան ցենտրիֆուգումից հետո տեղափոխեք այն ուժեղացման փորձարկման տարածք:
4. ՊՇՌ ուժեղացման փորձարկում
1) PCR ռեակցիայի խողովակը դրեք լյումինեսցենտային PCR ուժեղացման գործիքի մեջ ուժեղացման հայտնաբերման համար:
2) ցիկլի պարամետրի կարգավորում.
| Ծրագիր | Ցիկլերի քանակը | Ջերմաստիճանը | Արձագանքման ժամանակը | |
| 1 | 1 | 50℃ | 10 րոպե | |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 վրկ | |
| 3 | 45 | 95℃ | 5 վրկ | |
| 60℃ | 30 վրկ | Լյումինեսցենտային հավաքածու | ||
3) հայտնաբերման կարգավորումներ.
Հայտնաբերման ալիքները դրված են FAM, VIC, ROX և CY5, որոնք համապատասխանում են ORF1ab, N գենին և E Gene, RNase P ներքին հսկողությանը համապատասխանաբար:«Quencher Dye»-ը և «Passive Reference»-ը ABI 7500 գործիքի համար սահմանված են «Ոչ մի»:Սահմանեք «Դրական հսկողություն», «Բացասական հսկողություն» և «Նմուշ (անհայտ)» նմուշների համապատասխանության հերթականությամբ և «Նմուշի անուն» սյունակում դրեք նմուշի անվանումը:
X-POCH16-ի համար գործողությունը և ծրագիրը հետևյալն են.
1) Ինքնաթեստն ավարտվելուց հետո բացեք կափարիչը և դրեք PCR ռեակցիայի խողովակները գործիքի նշանակված դիրքերում:
2) Սկսեք ընտրելով «Exper»:տարբերակ.Ընտրեք «Բոլորը» տարբերակը կամ ձեռքով ընտրեք արձագանքման տարածքը էկրանի ձախ կողմում:
3) Ընտրեք «LOAD» տարբերակը;ընտրեք թեստային ծրագիր;սեղմեք «ԿԱՏԱՐՎԱԾ» և «ԳՈՐԾԵԼ»:Ծրագիրը ավարտելու համար տևում է 30 րոպե 42 վրկ:
Default ծրագրի հայտնաբերման ալիքները դրված են FAM, VIC, ROX և CY5, համապատասխանաբար ORF1ab, N գենին և E Gene, RNase P ներքին հսկողությանը:
Default ծրագրի ցիկլի պարամետրը հետևյալն է.
| Ծրագիր | Թիվ | Ջերմաստիճանը | Արձագանքման ժամանակը |
| 1 | 1 | 50℃ | 2 րոպե |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 վրկ |
| 3 | 41 | 95℃ | 2 վրկ |
| 60℃ | 13 վրկ | Լյումինեսցենտ |
5. Շեմի կարգավորում
Համաձայն վերլուծված պատկերի, կարգավորեք սկզբնական արժեքը, բազային և շեմային արժեքի վերջի արժեքը (Սկսման և ավարտի արժեքը խորհուրդ է տրվում սահմանել համապատասխանաբար 3 և 15, իսկ բացասական հսկողության ուժեղացման կորը կարգավորվում է հարթ կամ շեմային գիծից ցածր), սեղմեք Վերլուծություն՝ վերլուծության նմուշի Ct արժեքն ավտոմատ կերպով ստանալու համար:Դիտեք արդյունքները Հաշվետվության միջերեսում:
6. Որակի վերահսկման ստանդարտ
Կոմպլեկտի յուրաքանչյուր հսկիչ պետք է համապատասխանի «S» կորով հետևյալ պահանջներին, հակառակ դեպքում փորձն անվավեր է:
| Հայտնաբերման ալիքներ | Բացասական վերահսկողություն | Դրական վերահսկողություն |
| FAM (ORF1ab) | Ոչ Ct | Ct≤38 |
| VIC(N) | Ոչ Ct | Ct≤38 |
| ROX (E) | Ոչ Ct | Ct≤38 |
| CY5 (RP) | Ոչ Ct | Ct≤38 |
【Կտրող արժեք】
Համաձայն 100 բերանային շվաբրի և 100 խորխի նմուշների արդյունքների, ինչպես նաև ROC կորի մեթոդով, այս հավաքածուի OFR1ab, N գեների E գենի Cut-off արժեքը Ct = 38 է:
ՀՏՀ
Այս փաթեթում իրական ժամանակի ֆլուորեսցենտային PCR տեխնոլոգիայի պրայմերներն ու զոնդերը նախատեսված են 2019-nCoV-ի ORF1ab, N և E գենի համապատասխանաբար պահպանված և հատուկ շրջանների համար:PCR ուժեղացման ժամանակ զոնդը կապվում է կաղապարին, և զոնդի 5' վերջի ռեպորտաժային խումբը ճեղքվում է Taq ֆերմենտի կողմից (5'→3' էկզոնուկլեազի ակտիվություն), դրանով իսկ հեռանալով մարող խմբից՝ առաջացնելով լյումինեսցենտային ազդանշան: .Իրական ժամանակի ուժեղացման կորը ավտոմատ կերպով գծագրվում է հայտնաբերված ֆլուորեսցենտային ազդանշանի հիման վրա, և Ct-ի նմուշի արժեքը հաշվարկվում է:FAM, VIC և ROX ֆտորոֆորները պիտակավորված են ORF1ab գենի, N գենի և E գենի զոնդերի վրա:Մեկ թեստ օգտագործելով՝ 2019-nCoV-ի վերը նշված երեք գեների որակական հայտնաբերումը կարող է իրականացվել միաժամանակ։
Հավաքածուն տրամադրվում է ներքին հսկողությամբ, որը ուղղված է RNase P գենին՝ վերահսկելու կլինիկական նմուշների հավաքագրումը, մշակումը, արդյունահանումը և RT-PCR գործընթացը՝ կեղծ բացասական արդյունքներից խուսափելու համար:Ներքին հսկողությունը պիտակավորված է CY5 լյումինեսցենտային խմբով:
1. Վերլուծեք և մեկնաբանեք թեստի արդյունքները, երբ գործիքը նորմալ է, և դրական հսկողությունը, բացասական վերահսկողությունը և ներքին հսկողության թեստի արդյունքը համապատասխանում են որակի վերահսկման ստանդարտին:
2. Ներքին հսկողության ուժեղացման կորը (CY5) ցույց է տալիս տիպիկ S կորը և Ct ≤ 38, թիրախ գեների արդյունքների մեկնաբանումը ենթարկվում է հետևյալ պայմաններին.
| Հայտնաբերման ալիքներ | Թիրախային գեների արդյունքների մեկնաբանություն | ||
| FMA | VIC (N գեն) | ROX (E գեն) | |
| Ct≤38 | Ct≤38 | Ct≤38 | Տիպիկ S ուժեղացման կորի դեպքում Ct արժեքը ≤38 է, համապատասխան թիրախ գենը դրական է: |
| 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | Տիպիկ S ուժեղացման կորով, նորից փորձարկեք նմուշի համապատասխան թիրախային գենը: Եթե Ct արժեքը＜ 40 S-ի տիպիկ ուժեղացման կորով, համապատասխան թիրախ գենը դրական է.եթե Ct արժեքը≥40, համապատասխան թիրախ գենը բացասական է |
| Ct≥40 | Ct≥40 | Ct≥40 | Համապատասխան թիրախային գենը բացասական է |
Արդյունքների մեկնաբանություն 2019-nCoV-ի համար.
ORF1ab, N գենի և E գենի արդյունքների համաձայն, մեկնաբանությունը հետևյալն է.
1) Եթե հայտնաբերված գեների երկու կամ երեք գեները դրական են, 2019-nCoV-ը դրական է.
2) Եթե հայտնաբերված գեներից ՄԻԱՅՆ ՄԵԿԸ կամ ՈՉ ՄԵԿԸ դրական է, 2019-nCoV-ը բացասական է:
Նշում. Դրական նմուշի ուժեղացման կորը պետք է լինի տիպիկ S կորով:Այնուամենայնիվ, եթե թիրախային կոնցենտրացիան չափազանց բարձր է, ներքին ստանդարտ հսկողությունը չի կարող ուժեղացվել, և նմուշը կարող է ուղղակիորեն գնահատվել որպես դրական:Եթե թիրախային գեներից որևէ մեկը ստանա Ct≤38, 2019-nCoV-ը դրական է։Եթե թիրախային գեներից որևէ մեկը ստանում է Ct≥40, 2019-nCoV-ը բացասական է։Եթե Ct≥40 կամ որևէ արժեք ցույց չի տալիս, թիրախ գենի մեկնաբանումը բացասական է:
3. Եթե FAM, VIC, ROX և Cy5 ալիքների բոլոր Ct արժեքները 38-ից ավելի են կամ չկա ակնհայտ բնորոշ S ուժեղացման կոր.
1) Նմուշում կա/կան նյութ(ներ), որոնք արգելակում են ՊՇՌ ռեակցիան:Խորհուրդ է տրվում նմուշը նոսրացնել՝ նորից փորձարկվելու համար:
2) Նուկլեինաթթվի արդյունահանման պրոցեսն աննորմալ է, ուստի առաջարկվում է նորից հանել
նուկլեինաթթու վերստուգման համար:
3) Այս նմուշը նմուշառման պահին որակավորված նմուշ ՉԻ եղել կամ դեգրադացվել է
տեղափոխման և պահպանման ժամանակ.
Դրանք երկու եղանակներ են, որոնցով մենք կարող ենք բացահայտել այս իրավիճակները՝ NAAT և Antigen:
(Գալիս է Լոս Անջելեսի CDC-ից)
