page_banner

produk

Beberapa kit qPCR untuk deteksi 2019-nCoV (1 tabung)

Kit ini adalah PCR neon real-time probe TaqMan untuk mendeteksi secara kualitatif asam nukleat gen ORF1ab, N dan E dari 2019-nCoV (SARS-CoV-2) dalam swab nasofaring, swab orofaring, cairan lavage alveolar, air liur, dan dahak pada pasien dengan gejala infeksi pernapasan dan kontak dekat.


Rincian produk

Organisasi Kesehatan Dunia (WHO) memandu bahwa tes diagnostik cepat pendeteksi antigen (Ag-RDR) dapat menawarkan cara yang lebih cepat dan lebih murah untuk mendiagnosis infeksi SARS-CoV-2 aktif daripada tes amplifikasi asam nukleat (NAAT), dan WHO juga merekomendasikan bahwa Ag-RDT yang memenuhi persyaratan kinerja minimum dapat digunakan untuk deteksi kasus primer, pelacakan kontak, selama investigasi wabah, dan untuk memantau tren kejadian penyakit di masyarakat.

Beberapa kit qPCR untuk deteksi 2019-nCoV (1 tabung) (3)

Fitur

● Komprehensif:Tiga gen target terdeteksi dalam satu tes

● kompatibel:Adaptif untuk peralatan umum dengan saluran CY5, FAM, VIC/HEX.

● Performa luar biasa:Sensitivitas dan spesifisitas tinggi, LOD = 200 kopi/ml.

Parameter Teknis

Spesifikasi Kemasan

50 tes/kit, 100 tes/kit

Wilayah Sasaran

ORF1ab, N, E

Sampel yang Berlaku

Sputum, Usap Orofaringeal

Batas Deteksi

200 eksemplar/ml

Tingkat Kebetulan Total

99,55%

Nilai Ct (CV,%)

≤5,0%

Tingkat Kebetulan Positif

99,12%

Tingkat Kebetulan Negatif

100%

Kondisi Penyimpanan dan Tanggal Kedaluwarsa

Disimpan pada suhu -20±5℃, dan berlaku untuk sementara selama 12 bulan.

Kontrol Internal

Ya

Nomor katalog

A7793YF-50T, A7793YF-100T

Sertifikasi

CE

Spesimen

Usap nasofaring, Usap orofaring, Cairan lavage alveolar, Air liur dan dahak

Instrumen yang Berlaku

ABI 7500, Roche Light Cycler 480Ⅱ , Roche Cobas z 480, Sistem PCR Real-Time SLAN-96P

Prosedur pengetesan

Beberapa kit qPCR untuk deteksi 2019-nCoV (2 tabung) (1)

1. Ekstraksi Asam Nukleat

Pengoperasian harus dilakukan sesuai dengan manual kit ekstraksi.

2. Persiapan Sistem:

1) Keluarkan reagen dan cairkan reagen sepenuhnya.Balikkan campuran dan centrifuge segera.N reaksi uji (N = jumlah sampel yang akan diuji + kontrol positif + kontrol negatif + 1) masing-masing disiapkan untuk sistem reaksi, sebagai berikut.

Vomponentss

Volume untuk 1 sistem reaksi

Volume untuk sistem reaksi N

Campuran larutan reaksi amplifikasi asam nukleat (A7793YF)

18 uL

18 μL * N

Campuran enzim

2 µL

2 µL * N

Volume total

20 µL

20 μL * N

2) Distribusi reaksi: Larutan reaksi dicampur dan disentrifugasi, dan masing-masing tabung dibagikan dalam jumlah 20μL dalam tabung PCR yang cocok untuk peralatan PCR fluoresensi.

3. Memuat

5μL asam nukleat sampel yang diekstraksi, asam nukleat kontrol positif dan asam nukleat kontrol negatif ditambahkan ke sistem reaksi, dan total volume reaksi adalah 25μL.Kencangkan penutup tabung dan pindahkan ke area uji amplifikasi setelah sentrifugasi beberapa detik.

4. Uji Amplifikasi PCR

1) Masukkan tabung reaksi PCR ke dalam instrumen amplifikasi PCR neon untuk deteksi amplifikasi.

2) Pengaturan parameter siklus:

Program

Jumlah siklus

Suhu

Waktu reaksi

1

1

50 ℃

10 menit

2

1

95 ℃

30 detik

3

45

95 ℃

5 dtk

60 ℃

30 detik

Koleksi Fluoresensi

3) Pengaturan deteksi:

Saluran deteksi diatur ke FAM, VIC ,ROX dan CY5, masing-masing sesuai dengan ORF1ab, gen N, dan Gen E, kontrol internal RNase P."Quencher Dye" dan "Passive Reference" disetel ke "None" untuk instrumen ABI 7500.Tetapkan Kontrol Positif, Kontrol Negatif, dan Sampel (Tidak Diketahui) sesuai urutan sampel, dan tetapkan nama sampel di kolom "Nama Sampel".

Untuk X-POCH16, operasi dan programnya adalah sebagai berikut:

1) Setelah swa-uji selesai, buka tutupnya dan letakkan tabung reaksi PCR pada posisi yang ditentukan pada instrumen.

2) Mulailah dengan memilih "Exper."pilihan.Pilih opsi "Semua" atau pilih area reaksi secara manual di sisi kiri layar.

3) Pilih opsi "BEBAN";pilih program uji;klik "DONE" dan "RUN".Program ini membutuhkan waktu 30 menit42 detik untuk diselesaikan.

Saluran deteksi program Default diatur ke FAM, VIC, ROX dan CY5, masing-masing sesuai dengan ORF1ab, gen N, dan Gen E, kontrol internal RNase P.

Parameter siklus dari program Default adalah sebagai berikut:

Program

Jumlah
siklus

Suhu

Waktu reaksi

1

1

50 ℃

2 menit

2

1

95 ℃

30 detik

3

41

95 ℃

2 detik

60 ℃

13 detik

Fluoresensi
Koleksi

5. Pengaturan Ambang Batas

Menurut gambar yang dianalisis, sesuaikan nilai Mulai, nilai Akhir dari Garis Dasar dan nilai Ambang Batas (Nilai awal dan nilai akhir direkomendasikan masing-masing ditetapkan menjadi 3 dan 15, dan kurva amplifikasi dari kontrol negatif disesuaikan menjadi datar atau lebih rendah dari Garis ambang), klik Analisis untuk secara otomatis mendapatkan analisis nilai Ct sampel.Lihat hasilnya di antarmuka Laporan.

6. Standar Kontrol Kualitas

Setiap kontrol kit harus memenuhi persyaratan berikut dengan kurva 'S', jika tidak, percobaan tidak valid.

Saluran deteksi

Kontrol negatif

Kontrol positif

FAM(ORF1ab)

Tidak ada Kt

Ct≤38

VIC(T)

Tidak ada Kt

Ct≤38

ROX(E)

Tidak ada Kt

Ct≤38

CY5(RP)

Tidak ada Kt

Ct≤38

【Nilai Batas】

Berdasarkan hasil 100 sampel swab orofaringeal dan 100 sampel sputum, serta dengan metode kurva ROC, nilai Cut-off OFR1ab, N gen E Gen kit ini adalah Ct = 38

FAQ

Bagaimana kit ini bekerja?

Dalam kit ini, primer dan probe dari teknologi PCR fluoresen real-time dirancang untuk wilayah konservasi dan spesifik gen ORF1ab, N, dan E masing-masing dari 2019-nCoV.Selama amplifikasi PCR, probe berikatan dengan template, dan kelompok reporter ujung 5' dari probe dibelah oleh enzim Taq (aktivitas eksonuklease 5'→3'), sehingga menjauh dari kelompok quenching untuk menghasilkan sinyal fluoresen .Kurva amplifikasi real-time secara otomatis diplot berdasarkan sinyal fluoresensi yang terdeteksi, dan nilai sampel Ct dihitung.Fluorofor FAM , VIC dan ROX diberi label untuk probe gen ORF1ab , gen N dan gen E .Dengan menggunakan satu tes, deteksi kualitatif ketiga gen 2019-nCoV di atas dapat dilakukan secara bersamaan.

Kit ini dilengkapi dengan kontrol internal yang menargetkan gen RNase P untuk memantau pengumpulan sampel klinis, penanganan, ekstraksi, dan proses RT-PCR untuk menghindari hasil negatif palsu.Kontrol internal diberi label dengan grup neon CY5.

Bagaimana menginterpretasikan hasil tes?

1. Menganalisis dan menginterpretasikan hasil pengujian ketika instrumen normal, dan hasil pengujian kontrol positif, kontrol negatif dan kontrol internal memenuhi standar kontrol kualitas.

2. Kurva amplifikasi kontrol internal (CY5) menunjukkan kurva S tipikal dan Ct ≤ 38, interpretasi hasil gen target tunduk pada kondisi berikut.

Saluran deteksi

Interpretasi hasil gen target

FMA
(ORF1ab)

VIC

(gen N)

ROX

(gen E)

Ct≤38

Ct≤38

Ct≤38

Dengan kurva amplifikasi S tipikal, nilai Ct≤38, gen target yang sesuai adalah positif.

38 < Kt < 40

38 < Kt < 40

38 < Kt < 40

Dengan kurva amplifikasi S tipikal, uji ulang gen target yang sesuai dari sampel lagi.

Jika nilai Ct < 40 dengan kurva amplifikasi S tipikal, gen target yang sesuai adalah positif;jika nilai Ct≥40, gen target yang sesuai adalah negatif

Ct≥40

Ct≥40

Ct≥40

Gen target yang sesuai adalah negatif

Interpretasi hasil untuk 2019-nCoV:

Menurut hasil ORF1ab, gen N dan gen E, interpretasinya sebagai berikut:

1) Jika DUA atau TIGA gen dari gen yang terdeteksi positif, maka 2019-nCoV positif;

2) Jika HANYA SATU atau TIDAK ADA gen yang terdeteksi positif, 2019-nCoV negatif.

Catatan: Kurva amplifikasi sampel positif harus dengan kurva S tipikal.Namun, jika konsentrasi target terlalu tinggi, kontrol standar internal mungkin tidak diperkuat dan sampel dapat dinilai positif secara langsung.Jika ada dua gen target yang mendapatkan Ct≤38, 2019-nCoV positif.Jika ada dua gen target yang mendapatkan Ct≥40, 2019-nCoV negatif.Jika Ct≥40, atau tidak menunjukkan nilai, hasil interpretasi gen target negatif.

3. Jika semua nilai Ct saluran FAM, VIC, ROX dan Cy5 lebih dari 38 atau tidak ada kurva amplifikasi khas S yang jelas:
1) Ada zat dalam sampel yang menghambat reaksi PCR.Disarankan untuk mengencerkan sampel untuk diuji ulang.
2) Proses ekstraksi asam nukleat tidak normal, sehingga disarankan untuk melakukan ekstraksi ulang
asam nukleat untuk pengujian ulang.
3) Sampel ini BUKAN sampel yang memenuhi syarat pada saat pengambilan sampel, atau terdegradasi
selama pengangkutan dan penyimpanan.

Berapa banyak cara kita dapat mendeteksi apakah kita telah terinfeksi COVID-19/SARS-CoV-2

Ada 2 cara kami dapat mendeteksi situasi ini: NAAT dan Antigen.

Kaset Tes Cepat Antibodi Netralisasi (5)

(Berasal dari CDC Los Angeles)


  • Sebelumnya:
  • Berikutnya:

  • Tulis pesan Anda di sini dan kirimkan kepada kami