პროდუქტის დეტალი
ჯანდაცვის მსოფლიო ორგანიზაცია (WHO) ხელმძღვანელობს, რომ ანტიგენის გამოვლენის სწრაფი დიაგნოსტიკური ტესტები (Ag-RDRs) შეუძლია შესთავაზოს უფრო სწრაფი და ნაკლებად ძვირი გზა აქტიური SARS-CoV-2 ინფექციის დიაგნოსტიკისთვის, ვიდრე ნუკლეინის მჟავას ამპლიფიკაციის ტესტები (NAATs), და ჯანმო ასევე რეკომენდაციას იძლევა. რომ Ag-RDT-ები, რომლებიც აკმაყოფილებენ შესრულების მინიმალურ მოთხოვნებს, შეიძლება გამოყენებულ იქნას პირველადი შემთხვევის გამოვლენისთვის, კონტაქტის კვალიფიკაციისთვის, ეპიდემიის გამოკვლევების დროს და თემებში დაავადების შემთხვევების ტენდენციების მონიტორინგისთვის.
მახასიათებლები
● ყოვლისმომცველი:სამი სამიზნე გენი აღმოაჩენს ერთ ტესტში
● თავსებადი:ადაპტირებულია საერთო აღჭურვილობასთან CY5, FAM, VIC/HEX არხებით.
● შესანიშნავი შესრულება:მაღალი მგრძნობელობა და სპეციფიკა, LOD = 200 ასლი/მლ.
ტექნიკური პარამეტრი
| შეფუთვის სპეციფიკაცია | 50 ტესტი / ნაკრები, 100 ტესტი / ნაკრები |
| სამიზნე რეგიონი | ORF1ab, N, E |
| მოქმედი ნიმუში | ნახველი, ოროფარინგეალური ნაცხი |
| გამოვლენის ლიმიტი | 200 ეგზემპლარი/მლ |
| მთლიანი დამთხვევის მაჩვენებელი | 99.55% |
| Ct მნიშვნელობა (CV,%) | ≤5.0% |
| დადებითი დამთხვევის მაჩვენებელი | 99.12% |
| უარყოფითი დამთხვევის მაჩვენებელი | 100% |
| შენახვის პირობები და ვარგისიანობის ვადა | ინახება -20±5℃ და მოქმედებს დროებით 12 თვის განმავლობაში. |
| Შიდა კონტროლი | დიახ |
| კატალოგის ნომერი | A7793YF-50T, A7793YF-100T |
| სერტიფიცირება | CE |
| ნიმუშები | ნაზოფარინგეალური ნაცხი, ოროფარინგეალური ნაცხი, ალვეოლური ამორეცხვა, ნერწყვი და ნახველი |
| მოქმედი ინსტრუმენტი | ABI 7500, Roche Light Cycler 480Ⅱ, Roche Cobas z 480, SLAN-96P რეალურ დროში PCR სისტემა |
ტესტირების პროცედურა
1. ნუკლეინის მჟავის ექსტრაქცია
ოპერაცია უნდა განხორციელდეს ექსტრაქციის ნაკრების სახელმძღვანელოს მიხედვით.
2. სისტემის მომზადება:
1) ამოიღეთ რეაგენტი და გალღეთ რეაგენტი მთლიანად.გადააბრუნეთ ნარევი და დაუყონებლივ გააკეთეთ ცენტრიფუგა.N ტესტის რეაქციები (N = შესამოწმებელი ნიმუშების რაოდენობა + დადებითი კონტროლი + უარყოფითი კონტროლი + 1) მზადდება რეაქციის სისტემებისთვის, შესაბამისად, შემდეგნაირად.
| Vomponentss | მოცულობა 1 რეაქციის სისტემისთვის | მოცულობა N რეაქციის სისტემისთვის |
| ნუკლეინის მჟავას გამაძლიერებელი რეაქციის ხსნარი Mix (A7793YF) | 18 μL | 18 μL * N |
| ფერმენტის ნარევი | 2 μL | 2 μL * N |
| მთლიანი მოცულობა | 20 μL | 20 μL * N |
2) რეაქციის განაწილება: რეაქციის ხსნარი იყო შერეული და ცენტრიფუგირებული და თითოეული ტუბი განაწილდა 20 μL ოდენობით PCR მილში, რომელიც შესაფერისი იყო ფლუორესცენტული PCR აპარატისთვის.
3. ჩატვირთვა
რეაქციის სისტემებს ემატება ამოღებული ნიმუშის ნუკლეინის მჟავის 5 μL, დადებითი კონტროლის ნუკლეინის მჟავა და უარყოფითი კონტროლის ნუკლეინის მჟავა, ხოლო რეაქციის მთლიანი მოცულობა არის 25 μL.მიამაგრეთ მილის საფარი და გადაიტანეთ გამაძლიერებელი ტესტის ზონაში ცენტრიფუგაციის რამდენიმე წამის შემდეგ.
4. PCR ამპლიფიკაციის ანალიზი
1) ჩადეთ PCR რეაქციის მილი ფლუორესცენტური PCR გამაძლიერებელი ინსტრუმენტში ამპლიფიკაციის გამოვლენისთვის.
2) ციკლის პარამეტრის დაყენება:
| პროგრამა | ციკლების რაოდენობა | ტემპერატურა | Რეაქციის დრო | |
| 1 | 1 | 50℃ | 10 წთ | |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 წმ | |
| 3 | 45 | 95℃ | 5 წმ | |
| 60℃ | 30 წმ | ფლუორესცენციის კოლექცია | ||
3) გამოვლენის პარამეტრები:
გამოვლენის არხები დაყენებულია FAM, VIC, ROX და CY5, რაც შეესაბამება ORF1ab, N გენს და E Gene, RNase P შიდა კონტროლს, შესაბამისად."Quencher Dye" და "Passive Reference" დაყენებულია "None" ABI 7500 ინსტრუმენტისთვის.დააყენეთ დადებითი კონტროლი, უარყოფითი კონტროლი და ნიმუში (უცნობი) ნიმუშების შესაბამისი თანმიმდევრობით და დააყენეთ ნიმუშის სახელი სვეტში "Sample Name".
X-POCH16-ისთვის ოპერაცია და პროგრამა შემდეგია:
1) თვითშემოწმების დასრულების შემდეგ გახსენით სახურავი და მოათავსეთ PCR რეაქციის მილები ინსტრუმენტში დანიშნულ პოზიციებზე.
2) დაიწყეთ "Exper"-ის არჩევით.ვარიანტი.აირჩიეთ "ყველა" ვარიანტი ან ხელით აირჩიეთ რეაქციის არე ეკრანის მარცხენა მხარეს.
3) აირჩიეთ "LOAD" ვარიანტი;შეარჩიეთ ტესტის პროგრამა;დააჭირეთ "შესრულებულია" და "RUN".პროგრამის დასრულებას 30 წუთი 42 წამი სჭირდება.
ნაგულისხმევი პროგრამის გამოვლენის არხები დაყენებულია FAM, VIC, ROX და CY5, შესაბამისად ORF1ab, N გენისა და E Gene, RNase P შიდა კონტროლის შესაბამისად.
ნაგულისხმევი პროგრამის ციკლის პარამეტრი შემდეგია:
| პროგრამა | Რაოდენობა | ტემპერატურა | Რეაქციის დრო |
| 1 | 1 | 50℃ | 2 წთ |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 წმ |
| 3 | 41 | 95℃ | 2 წმ |
| 60℃ | 13 წმ | ფლუორესცენცია |
5. ბარიერის დაყენება
გაანალიზებული სურათის მიხედვით, დაარეგულირეთ საწყისი მნიშვნელობა, საბაზისო და ზღვრული მნიშვნელობის დასასრული (საწყისი და დასასრული მნიშვნელობა რეკომენდირებულია დაყენებული იყოს 3 და 15 შესაბამისად, ხოლო უარყოფითი კონტროლის გამაძლიერებელი მრუდი მორგებულია ბრტყელად ან ზღვრულ ხაზზე დაბალი), დააჭირეთ ანალიზს, რათა ავტომატურად მიიღოთ ანალიზის ნიმუში Ct მნიშვნელობა.იხილეთ შედეგები ანგარიშის ინტერფეისში.
6. ხარისხის კონტროლის სტანდარტი
ნაკრების თითოეული კონტროლი უნდა აკმაყოფილებდეს შემდეგ მოთხოვნებს "S" მრუდით, წინააღმდეგ შემთხვევაში ექსპერიმენტი არასწორია.
| გამოვლენის არხები | უარყოფითი კონტროლი | პოზიტიური კონტროლი |
| FAM (ORF1ab) | არა Ct | Ct≤38 |
| VIC(N) | არა Ct | Ct≤38 |
| ROX(E) | არა Ct | Ct≤38 |
| CY5 (RP) | არა Ct | Ct≤38 |
【შეწყვეტის მნიშვნელობა】
ოროფარინგეალური ნაცხის 100 და ნახველის 100 ნიმუშის შედეგების მიხედვით და ROC მრუდის მეთოდით, ამ ნაკრების OFR1ab, N გენების E გენის Cut-off მნიშვნელობა არის Ct = 38.
FAQ
ამ კომპლექტში, რეალურ დროში ფლუორესცენტური PCR ტექნოლოგიის პრაიმერები და ზონდები შექმნილია 2019-nCoV-ის ORF1ab, N და E გენის კონსერვაციულ და სპეციფიკურ რეგიონებზე, შესაბამისად.PCR გაძლიერების დროს ზონდი აკავშირებს შაბლონს და ზონდის 5'-ბოლო რეპორტიორის ჯგუფი იშლება Taq ფერმენტის მიერ (5'→3' ეგზონუკლეაზას აქტივობა), რითაც შორდება ჩაქრობის ჯგუფს ფლუორესცენტური სიგნალის წარმოქმნით. .რეალურ დროში გამაძლიერებელი მრუდი ავტომატურად იწერება გამოვლენილი ფლუორესცენციის სიგნალის საფუძველზე და გამოითვლება ნიმუშის Ct მნიშვნელობა.FAM, VIC და ROX ფტორფორები მონიშნულია ORF1ab გენის, N გენის და E გენის ზონდებზე.ერთი ტესტის გამოყენებით, 2019-nCoV ზემოაღნიშნული სამი გენის ხარისხობრივი გამოვლენა შეიძლება ერთდროულად განხორციელდეს.
ნაკრები მოწოდებულია შიდა კონტროლით, რომელიც მიზნად ისახავს RNase P გენს, კლინიკური ნიმუშების შეგროვების, დამუშავების, ექსტრაქციის და RT-PCR პროცესის მონიტორინგის მიზნით, რათა თავიდან იქნას აცილებული ცრუ უარყოფითი შედეგები.შიდა კონტროლი მონიშნულია CY5 ფლუორესცენტური ჯგუფით.
1. ტესტის შედეგების ანალიზი და ინტერპრეტაცია, როდესაც ინსტრუმენტი ნორმალურია და დადებითი კონტროლი, უარყოფითი კონტროლი და შიდა კონტროლის ტესტის შედეგი აკმაყოფილებს ხარისხის კონტროლის სტანდარტს.
2. შიდა კონტროლის ამპლიფიკაციის მრუდი (CY5) აჩვენებს ტიპიურ S მრუდს და Ct ≤ 38, სამიზნე გენების შედეგების ინტერპრეტაცია ექვემდებარება შემდეგ პირობებს.
| გამოვლენის არხები | სამიზნე გენების შედეგების ინტერპრეტაცია | ||
| FMA | VIC (N გენი) | ROX (E გენი) | |
| Ct≤38 | Ct≤38 | Ct≤38 | ტიპიური S გაძლიერების მრუდით, Ct მნიშვნელობა არის≤38, შესაბამისი სამიზნე გენი დადებითია. |
| 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | ტიპიური S გაძლიერების მრუდით, ხელახლა შეამოწმეთ ნიმუშის შესაბამისი სამიზნე გენი. თუ Ct მნიშვნელობა＜ 40 ტიპიური S ამპლიფიკაციის მრუდით, შესაბამისი სამიზნე გენი დადებითია;თუ Ct მნიშვნელობა≥40, შესაბამისი სამიზნე გენი უარყოფითია |
| Ct≥40 | Ct≥40 | Ct≥40 | შესაბამისი სამიზნე გენი უარყოფითია |
2019-nCoV შედეგების ინტერპრეტაცია:
ORF1ab, N გენის და E გენის შედეგების მიხედვით, ინტერპრეტაცია შემდეგია:
1) თუ აღმოჩენილი გენების ორი ან სამი გენი დადებითია, 2019-nCoV დადებითია;
2) თუ აღმოჩენილი გენიდან მხოლოდ ერთი ან არცერთი დადებითია, 2019-nCoV უარყოფითია.
შენიშვნა: დადებითი ნიმუშის გაძლიერების მრუდი უნდა იყოს ტიპიური S მრუდით.თუმცა, თუ სამიზნე კონცენტრაცია ძალიან მაღალია, შიდა სტანდარტის კონტროლი შეიძლება არ გაძლიერდეს და ნიმუში შეიძლება პირდაპირ შეფასდეს, როგორც დადებითი.თუ რომელიმე სამიზნე გენი მიიღებს Ct≤38, 2019-nCoV დადებითია.თუ რომელიმე სამიზნე გენი მიიღებს Ct≥40, 2019-nCoV უარყოფითია.თუ Ct≥40, ან არ აჩვენებს მნიშვნელობას, სამიზნე გენის შედეგების ინტერპრეტაცია უარყოფითია.
3. თუ FAM, VIC, ROX და Cy5 არხების ყველა Ct მნიშვნელობა 38-ზე მეტია ან არ არსებობს აშკარა ტიპიური S გაძლიერების მრუდი:
1) ნიმუშში არის/არსებობს ნივთიერება(ები), რომლებიც აინჰიბირებენ PCR რეაქციას.რეკომენდირებულია ნიმუშის განზავება ხელახალი ტესტირებისთვის.
2) ნუკლეინის მჟავას ექსტრაქციის პროცესი არანორმალურია, ამიტომ შემოთავაზებულია ხელახალი ექსტრაქცია
ნუკლეინის მჟავა ხელახალი ტესტირებისთვის.
3) ეს ნიმუში არ იყო კვალიფიციური ნიმუში სინჯის აღების დროს, ან დეგრადირებული
ტრანსპორტირებისა და შენახვის დროს.
ეს არის 2 გზა, რომლითაც შეგვიძლია გამოვავლინოთ ეს სიტუაციები: NAAT და ანტიგენი.
(მოდის ლოს-ანჯელესის CDC-დან)
