제품 상세 정보
세계보건기구(WHO)는 항원 검출 신속 진단 테스트(Ag-RDR)가 핵산 증폭 테스트(NAAT)보다 활동성 SARS-CoV-2 감염을 진단하는 더 빠르고 저렴한 방법을 제공할 수 있다고 안내하고 WHO도 권장합니다. 최소 성능 요구 사항을 충족하는 Ag-RDT는 1차 사례 감지, 접촉자 추적, 발생 조사 중 및 지역사회의 질병 발생 경향을 모니터링하는 데 사용될 수 있습니다.
특징
● 종합:하나의 테스트에서 3개의 표적 유전자 검출
● 호환:CY5, FAM, VIC/HEX 채널이 있는 일반 장비에 적응합니다.
● 뛰어난 성능:높은 민감도 및 특이도, LOD = 200 copies/ml.
기술적인 매개변수
| 포장 사양 | 50개 테스트/키트, 100개 테스트/키트 |
| 대상 지역 | ORF1ab, N, E |
| 적용 가능한 샘플 | 가래, 구강인두 면봉 |
| 검출 한계 | 200부/ml |
| 총 일치율 | 99.55% |
| Ct 값(CV, %) | ≤5.0% |
| 양의 일치율 | 99.12% |
| 음의 일치율 | 100% |
| 보관 조건 및 유효 기간 | -20±5℃에서 보관하며 12개월 동안 잠정적으로 유효합니다. |
| 내부 통제 | 예 |
| 카탈로그 번호 | A7793YF-50T, A7793YF-100T |
| 인증 | CE |
| 표본 | 비인두 면봉, 구강인두 면봉, 폐포 세척액, 타액 및 가래 |
| 적용 가능한 악기 | ABI 7500, Roche Light Cycler 480Ⅱ , Roche Cobas z 480, SLAN-96P Real-Time PCR System |
테스트 절차
1. 핵산 추출
추출 키트의 설명서에 따라 작업을 수행해야 합니다.
2. 시스템 준비:
1) 시약을 꺼내 완전히 녹인다.혼합물을 뒤집고 즉시 원심분리합니다.N개의 시험 반응(N = 시험할 샘플 수 + 양성 대조군 + 음성 대조군 + 1)은 다음과 같이 각각 반응 시스템에 대해 준비된다.
| 봄포넨츠 | 1 반응 시스템의 부피 | N 반응 시스템의 부피 |
| 핵산증폭반응액 Mix(A7793YF) | 18µL | 18µL * N |
| 효소 혼합물 | 2µL | 2µL * N |
| 총량 | 20µL | 20µL * N |
2) 반응분포: 반응액을 혼합하여 원심분리한 후 형광 PCR 장치에 적합한 PCR 튜브에 각각 20μL씩 분주하였다.
3. 로딩
추출된 샘플 핵산 5μL, 양성 대조군 핵산 및 음성 대조군 핵산을 반응 시스템에 첨가하고 총 반응 부피는 25μL입니다.튜브 커버를 고정하고 몇 초간의 원심분리 후 증폭 테스트 영역으로 옮깁니다.
4. PCR 증폭 분석
1) 증폭 검출을 위해 PCR 반응 튜브를 형광 PCR 증폭 장치에 넣습니다.
2) 주기 매개변수 설정:
| 프로그램 | 사이클 수 | 온도 | 반응 시간 | |
| 1 | 1 | 50℃ | 10 분 | |
| 2 | 1 | 95℃ | 30초 | |
| 3 | 45 | 95℃ | 5초 | |
| 60℃ | 30초 | 형광 수집 | ||
3) 감지 설정:
검출 채널은 각각 ORF1ab, N 유전자 및 E Gene, RNase P 내부 제어에 해당하는 FAM, VIC, ROX 및 CY5로 설정됩니다.ABI 7500 장비에 대해 "Quencher Dye" 및 "Passive Reference"는 "None"으로 설정됩니다.샘플이 일치하는 순서대로 양성 대조군, 음성 대조군, 샘플(알 수 없음)을 설정하고 "샘플 이름" 열에 샘플 이름을 설정합니다.
X-POCH16의 경우 작동 및 프로그램은 다음과 같습니다.
1) Self test가 끝나면 뚜껑을 열고 PCR reaction tube를 기기의 지정된 위치에 넣습니다.
2) "전문가"를 선택하여 시작합니다.옵션."모두" 옵션을 선택하거나 화면 왼쪽에서 수동으로 반응 영역을 선택합니다.
3) "로드" 옵션을 선택합니다.테스트 프로그램을 선택하십시오."완료" 및 "실행"을 클릭합니다.이 프로그램은 완료하는 데 30분 42초가 걸립니다.
기본 프로그램의 검출 채널은 각각 ORF1ab, N 유전자 및 E Gene, RNase P 내부 제어에 해당하는 FAM, VIC, ROX 및 CY5로 설정됩니다.
기본 프로그램의 주기 매개변수는 다음과 같습니다.
| 프로그램 | 수 | 온도 | 반응 시간 |
| 1 | 1 | 50℃ | 2분 |
| 2 | 1 | 95℃ | 30초 |
| 3 | 41 | 95℃ | 2초 |
| 60℃ | 13초 | 형광 |
5. 임계값 설정
분석된 영상에 따라 Baseline의 Start value, End value, Threshold value를 조정한다. 임계값 라인보다 낮은 경우) 분석을 클릭하면 샘플 Ct 값이 자동으로 분석됩니다.보고서 인터페이스에서 결과를 봅니다.
6. 품질관리기준
키트의 각 컨트롤은 'S' 곡선으로 다음 요구 사항을 충족해야 합니다. 그렇지 않으면 실험이 유효하지 않습니다.
| 감지 채널 | 네거티브 컨트롤 | 양성 대조군 |
| 팸(ORF1ab) | 코네티컷 없음 | Ct≤38 |
| VIC(엔) | 코네티컷 없음 | Ct≤38 |
| 록스(E) | 코네티컷 없음 | Ct≤38 |
| CY5(RP) | 코네티컷 없음 | Ct≤38 |
【컷오프 값】
100개의 구인두 도말 샘플과 100개의 객담 샘플의 결과에 따르면 ROC 곡선 방법을 사용하여 본 키트의 OFR1ab, N gene E Gene의 Cut-off 값은 Ct = 38입니다.
자주하는 질문
본 키트는 실시간 형광 PCR 기술의 프라이머와 프로브를 2019-nCoV의 ORF1ab, N, E 유전자의 보존 영역과 특정 영역으로 각각 디자인합니다.PCR 증폭 시 프로브가 주형에 결합하고 프로브의 5' 말단 리포터 그룹이 Taq 효소에 의해 절단(5'→3' 엑소뉴클레아제 활성)되어 소광 그룹에서 멀어지면서 형광 신호를 생성합니다. .검출된 형광 신호를 기반으로 실시간 증폭 곡선이 자동으로 플롯되고 샘플 Ct 값이 계산됩니다.FAM, VIC 및 ROX 형광단은 ORF1ab 유전자, N 유전자 및 E 유전자 프로브로 표시됩니다.하나의 테스트로 2019-nCoV의 위 3가지 유전자에 대한 정성 검출을 동시에 수행할 수 있습니다.
이 키트에는 위음성 결과를 피하기 위해 임상 샘플 수집, 취급, 추출 및 RT-PCR 프로세스를 모니터링하기 위해 RNase P 유전자를 대상으로 하는 내부 컨트롤이 제공됩니다.내부 통제는 CY5 형광 그룹으로 표시됩니다.
1. 기기가 정상이고 양성대조군, 음성대조군, 내부대조군 검사결과가 품질관리 기준에 부합할 때 검사결과를 분석 및 해석한다.
2. 내부 대조군(CY5)의 증폭 곡선은 전형적인 S 곡선을 나타내며 Ct ≤ 38, 표적 유전자의 결과 해석은 다음 조건에 따른다.
| 감지 채널 | 표적 유전자 결과 해석 | ||
| FMA | VIC (N 유전자) | 록스 (E 유전자) | |
| Ct≤38 | Ct≤38 | Ct≤38 | 일반적인 S 증폭 곡선에서 Ct 값은 ≤38이고 해당 표적 유전자는 양성입니다. |
| 38 ＜ CT ＜ 40 | 38 ＜ CT ＜ 40 | 38 ＜ CT ＜ 40 | 일반적인 S 증폭 곡선을 사용하여 샘플의 해당 표적 유전자를 다시 테스트합니다. 전형적인 S 증폭 곡선에서 Ct 값< 40인 경우 해당 표적 유전자는 양성입니다.Ct 값≥40인 경우 해당 표적 유전자는 음성입니다. |
| Ct≥40 | Ct≥40 | Ct≥40 | 해당 표적 유전자는 음성입니다. |
2019-nCoV 결과 해석:
ORF1ab, N 유전자 및 E 유전자의 결과에 따라 다음과 같이 해석됩니다.
1) 검출된 유전자 중 2개 또는 3개의 유전자가 양성이면 2019-nCoV는 양성입니다.
2) 검출된 유전자 중 하나만이 양성이면 2019-nCoV는 음성입니다.
참고: 양성 샘플의 증폭 곡선은 일반적인 S 곡선이어야 합니다.그러나 목표 농도가 너무 높으면 내부 표준 컨트롤이 증폭되지 않을 수 있으며 샘플을 양성으로 직접 판단할 수 있습니다.두 개의 표적 유전자가 Ct≤38이면 2019-nCoV는 양성입니다.표적 유전자 중 두 개가 Ct≥40이면 2019-nCoV는 음성입니다.Ct≥40이거나 값을 나타내지 않으면 표적 유전자의 결과는 음성으로 해석됩니다.
3. FAM, VIC, ROX 및 Cy5 채널의 모든 Ct 값이 38보다 크거나 명백한 전형적인 S 증폭 곡선이 없는 경우:
1) 샘플에 PCR 반응을 억제하는 물질이 있습니다.재검사를 위해 샘플을 희석하는 것이 좋습니다.
2) 핵산 추출 과정이 비정상적이므로 재추출을 권장합니다.
재시험용 핵산.
3) 이 샘플은 샘플링 당시 적격 샘플이 아니거나 성능이 저하되었습니다.
운송 및 보관 중.
이러한 상황을 감지할 수 있는 두 가지 방법은 NAAT와 Antigen입니다.
(로스앤젤레스 CDC에서 제공)
