Dettall tal-Prodott
L-Organizzazzjoni Dinjija tas-Saħħa (WHO) tiggwida li t-testijiet dijanjostiċi rapidi li jikxfu l-antiġeni (Ag-RDRs) jistgħu joffru mod aktar mgħaġġel u inqas għali biex tiġi djanjostikata infezzjoni attiva SARS-CoV-2 minn testijiet ta’ amplifikazzjoni tal-aċidu nuklejku (NAATs), u WHO tirrakkomanda wkoll li Ag-RDTs li jissodisfaw ir-rekwiżiti minimi ta' prestazzjoni jistgħu jintużaw għall-iskoperta tal-każi primarji, it-traċċar tal-kuntatti, waqt investigazzjonijiet tat-tifqigħa u biex jimmonitorjaw ix-xejriet tal-inċidenza tal-mard fil-komunitajiet.
Karatteristiċi
● Komprensiv:Tliet ġeni fil-mira jiskopru f'test wieħed
● kompatibbli:Adattiv għal tagħmir komuni b'kanali CY5, FAM, VIC/HEX.
● Prestazzjoni eċċellenti:Sensittività u speċifiċità għolja, LOD = 200 kopja/ml.
Parametru Tekniku
| Speċifikazzjoni tal-ippakkjar | 50 test/kit, 100 test/kit |
| Reġjun fil-mira | ORF1ab, N, E |
| Kampjun Applikabbli | Sputum, Tampun Orofarinġi |
| Limitu ta' Sejbien | 200 kopja/ml |
| Rata ta' Koinċidenza Totali | 99.55% |
| Valur Ct (CV,%) | ≤5.0% |
| Rata ta' Koinċidenza Pożittiva | 99.12% |
| Rata ta' Koinċidenza Negattiva | 100% |
| Kundizzjonijiet ta' Ħażna u Data ta' Skadenza | Maħżun f'-20±5℃, u huwa validu proviżorjament għal 12-il xahar. |
| Kontroll Intern | Iva |
| Numru tal-Katalgu | A7793YF-50T, A7793YF-100T |
| Ċertifikazzjoni | CE |
| Kampjuni | Tampun nażofarinġi, Tampun orofarinġi, Fluwidu tal-ħasil alveolari, Bżieq u sputum |
| Strument Applikabbli | ABI 7500, Roche Light Cycler 480Ⅱ , Roche Cobas z 480, SLAN-96P Real-Time PCR System |
Proċedura tat-Test
1. Estrazzjoni ta 'Aċidu Nuklejku
L-operazzjoni għandha titwettaq skond il-manwal tal-kit ta 'estrazzjoni.
2. Preparazzjoni tas-Sistema:
1) Oħroġ ir-reaġent u ħoll ir-reaġent kompletament.Aqleb it-taħlita u ċċentrifuga immedjatament.N reazzjonijiet tat-test (N = numru ta' kampjuni li jridu jiġu ttestjati + kontroll pożittiv + kontroll negattiv + 1) huma ppreparati għal sistemi ta' reazzjoni, rispettivament, kif ġej.
| Vomponentss | Volum għal sistema ta' reazzjoni waħda | Volum għal sistema ta' reazzjoni N |
| Soluzzjoni ta' reazzjoni ta' amplifikazzjoni ta' aċidu nuklejku Ħallat (A7793YF) | 18 µL | 18 µL * N |
| Taħlita ta' enżimi | 2 µL | 2 µL * N |
| Volum totali | 20 µL | 20 µL * N |
2) Distribuzzjoni tar-reazzjoni: Is-soluzzjoni tar-reazzjoni ġiet imħallta u ċentrifugata, u kull tubu ġie mqassam f'ammont ta '20μL f'tubu PCR adattat għal apparat PCR ta' fluworexxenza.
3. Tagħbija
5μL tal-kampjun estratt ta 'aċidu nuklejku, aċidu nuklejku ta' kontroll pożittiv u aċidu nuklejku ta 'kontroll negattiv huma miżjuda mas-sistemi ta' reazzjoni, u l-volum totali ta 'reazzjoni huwa 25μL.Qabbad l-għatu tat-tubu u ċċaqlaq lejn iż-żona tat-test ta 'amplifikazzjoni wara ftit sekondi ta' ċentrifugazzjoni.
4. Assaġġ ta 'Amplifikazzjoni tal-PCR
1) Poġġi t-tubu tar-reazzjoni tal-PCR fl-istrument fluworexxenti tal-amplifikazzjoni tal-PCR għall-iskoperta tal-amplifikazzjoni.
2) Issettjar tal-parametri taċ-ċiklu:
| Programm | Numru ta' ċikli | Temperatura | Ħin ta' reazzjoni | |
| 1 | 1 | 50℃ | 10 min | |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 sek | |
| 3 | 45 | 95℃ | 5 sek | |
| 60℃ | 30 sek | Ġbir tal-Fluworexxenza | ||
3) Issettjar ta 'skoperta:
Il-kanali ta 'skoperta huma ssettjati għal FAM, VIC ,ROX u CY5, li jikkorrispondu għal ORF1ab, ġene N, u E Gene, kontroll intern RNase P, rispettivament."Quencher Dye" u "Passive Reference" huma ssettjati għal "Xejn" għall-istrument ABI 7500.Issettja l-Kontroll Pożittiv, il-Kontroll Negattiv, u l-Kampjun (Mhux Magħruf) sabiex il-kampjuni jikkorrispondu, u ssettja l-isem tal-kampjun fil-kolonna "Isem tal-Kampjun".
Għal X-POCH16, l-operazzjoni u l-programm huma kif ġej:
1) Wara li jitlesta l-awto-test, iftaħ l-għatu u poġġi t-tubi tar-reazzjoni tal-PCR fil-pożizzjonijiet magħżula fl-istrument.
2) Ibda billi tagħżel l-"Espert."għażla.Agħżel l-għażla "Kull" jew agħżel manwalment iż-żona ta 'reazzjoni fuq in-naħa tax-xellug tal-iskrin.
3) Agħżel l-għażla "TAGĦBIJA";agħżel il-programm tat-test;ikklikkja "MAGĦMEL" u l-"RUN".Il-programm jieħu 30min42s biex jitlesta.
Il-kanali ta 'skoperta tal-programm Default huma ssettjati għal FAM, VIC, ROX u CY5, li jikkorrispondu għal ORF1ab, ġene N, u E Gene, kontroll intern RNase P, rispettivament.
Il-parametru taċ-ċiklu tal-programm Default huma kif ġej:
| Programm | Numru ta | Temperatura | Ħin ta' reazzjoni |
| 1 | 1 | 50℃ | 2min |
| 2 | 1 | 95℃ | 30sec |
| 3 | 41 | 95℃ | 2sec |
| 60℃ | 13sec | Fluworexxenza |
5. L-issettjar tal-limitu
Skont l-immaġni analizzata, aġġusta l-Valur tal-Bidu, il-Valur Tmiem tal-Linja Bażi u l-Valur tal-Livell (Il-valur tal-bidu u l-valur tat-tmiem huwa rakkomandat li jiġu ssettjati biex ikunu 3 u 15 rispettivament, u l-kurva tal-amplifikazzjoni tal-kontroll negattiv hija aġġustata biex tkun ċatta jew inqas mil-Linja tal-limitu), ikklikkja Analiżi biex awtomatikament tikseb l-analiżi tal-valur Ct tal-kampjun.Ara r-riżultati fl-interface tar-Rapport.
6. Standard ta 'Kontroll tal-Kwalità
Kull kontroll tal-kit għandu jissodisfa r-rekwiżiti li ġejjin bil-kurva 'S', inkella l-esperiment ma jkunx validu.
| Kanali ta' skoperta | Kontroll negattiv | Kontroll pożittiv |
| FAM(ORF1ab) | Nru Ct | Ct≤38 |
| VIC(N) | Nru Ct | Ct≤38 |
| ROX(E) | Nru Ct | Ct≤38 |
| CY5(RP) | Nru Ct | Ct≤38 |
【Valur ta' Qtugħ】
Skont ir-riżultati ta '100 kampjun ta' swab orofarinġi u 100 kampjun ta 'sputum, u bil-metodu tal-kurva ROC, il-valur Cut-off tal-OFR1ab, N ġeni E Gene ta' dan il-kit huma Ct = 38
FAQ
F'dan il-kit, primers u sondi ta 'teknoloġija PCR fluworexxenti f'ħin reali huma ddisinjati għar-reġjuni kkonservati u speċifiċi tal-ġene ORF1ab, N u E ta' 2019-nCoV rispettivament.Waqt l-amplifikazzjoni tal-PCR, is-sonda tingħaqad mal-mudell, u l-grupp reporter tat-tarf 5' tas-sonda jinqasam mill-enzima Taq (attività exonuclease 5'→3'), u b'hekk titbiegħed mill-grupp tat-tifi biex jiġġenera sinjal fluworexxenti .Il-kurva ta 'amplifikazzjoni f'ħin reali hija awtomatikament impinġa bbażata fuq is-sinjal ta' fluworexxenza misjuba, u l-valur Ct tal-kampjun huwa kkalkulat.Il-fluworofori FAM, VIC u ROX huma ttikkettjati għal sondi tal-ġene ORF1ab, tal-ġene N u tal-ġene E.Bl-użu ta 'test wieħed, skoperta kwalitattiva tat-tliet ġeni ta' hawn fuq ta '2019-nCoV tista' titwettaq fl-istess ħin.
Il-kit huwa pprovdut b'kontroll intern li jimmira l-ġene RNase P biex jimmonitorja l-ġbir, l-immaniġġjar, l-estrazzjoni u l-proċess RT-PCR ta 'kampjuni kliniċi biex jiġu evitati riżultati negattivi foloz.Il-kontroll intern huwa ttikkettjat bi grupp fluworexxenti CY5.
1. Analizza u interpreta r-riżultati tat-test meta l-istrument ikun normali, u l-kontroll pożittiv, il-kontroll negattiv u r-riżultat tat-test tal-kontroll intern jissodisfaw l-istandard tal-kontroll tal-kwalità.
2. Il-kurva ta 'amplifikazzjoni tal-kontroll intern (CY5) turi kurva S tipika u Ct ≤ 38, l-interpretazzjoni tar-riżultati tal-ġeni fil-mira hija soġġetta għall-kundizzjonijiet li ġejjin.
| Kanali ta' skoperta | Interpretazzjoni tar-riżultati tal-ġeni fil-mira | ||
| FMA | VIC (ġene N) | ROX (ġene E) | |
| Ct≤38 | Ct≤38 | Ct≤38 | B'kurva ta 'amplifikazzjoni S tipika, il-valur Ct huwa ≤38, il-ġene fil-mira korrispondenti huwa pożittiv. |
| 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | 38 ＜ Ct ＜ 40 | B'kurva ta 'amplifikazzjoni S tipika, erġa' ttestja l-ġene fil-mira korrispondenti tal-kampjun mill-ġdid. Jekk il-valur Ct＜ 40 b'kurva ta' amplifikazzjoni S tipika, il-ġene fil-mira korrispondenti huwa pożittiv;jekk il-valur Ct≥40, il-ġene fil-mira korrispondenti huwa negattiv |
| Ct≥40 | Ct≥40 | Ct≥40 | Il-ġene fil-mira korrispondenti huwa negattiv |
Interpretazzjoni tar-riżultati għall-2019-nCoV:
Skont ir-riżultati ta 'ORF1ab, ġene N u ġene E, interpretazzjoni kif ġej:
1) Jekk ŻEWĠ jew TLIET ġeni tal-ġeni misjuba huma pożittivi, l-2019-nCoV huwa pożittiv;
2) Jekk WIEĦED BISS jew EBDA mill-ġeni misjuba huwa pożittiv, l-2019-nCoV huwa negattiv.
Nota: Il-kurva ta' amplifikazzjoni tal-kampjun pożittiv għandha tkun b'kurva S tipika.Madankollu, jekk il-konċentrazzjoni fil-mira hija għolja wisq, il-kontroll standard intern jista 'ma jiġix amplifikat u l-kampjun jista' jiġi ġġudikat direttament bħala pożittiv.Jekk xi tnejn mill-ġeni fil-mira jiksbu Ct≤38, l-2019-nCoV huwa pożittiv.Jekk xi tnejn mill-ġeni fil-mira jiksbu Ct≥40, l-2019-nCoV huwa negattiv.Jekk Ct≥40, jew ma juru l-ebda valur, l-interpretazzjoni tar-riżultati tal-ġene fil-mira hija negattiva.
3. Jekk il-valuri Ct kollha tal-kanali FAM, VIC, ROX u Cy5 huma aktar minn 38 jew m'hemmx kurva ta' amplifikazzjoni S tipika ovvja:
1) Hemm/hemm sustanza(i) fil-kampjun li jinibixxu r-reazzjoni tal-PCR.Huwa rakkomandat li l-kampjun jiġi dilwit biex jerġa' jiġi ttestjat.
2) Il-proċess ta 'estrazzjoni ta' aċidu nuklejku huwa anormali, għalhekk huwa ssuġġerit li jerġa 'jiġbed
aċidu nuklejku għal test mill-ġdid.
3) Dan il-kampjun MHUX kampjun kwalifikat fil-ħin tat-teħid tal-kampjuni, jew degradat
waqt it-trasport u l-ħażna.
Huma 2 modi kif nistgħu niskopru dawn is-sitwazzjonijiet: NAAT u Antigen.
(Ġejja mis-CDC ta' Los Angeles)
