ఉత్పత్తి వివరాలు
ప్రపంచ ఆరోగ్య సంస్థ (WHO) న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ యాంప్లిఫికేషన్ టెస్ట్‌ల (NAATs) కంటే యాంటిజెన్-డిటెక్టింగ్ రాపిడ్ డయాగ్నొస్టిక్ పరీక్షలు (Ag-RDRs) యాక్టివ్ SARS-CoV-2 ఇన్‌ఫెక్షన్‌ని నిర్ధారించడానికి వేగవంతమైన మరియు తక్కువ ఖర్చుతో కూడిన మార్గాన్ని అందించగలవని మార్గనిర్దేశం చేస్తుంది మరియు WHO కూడా సిఫార్సు చేస్తుంది. కనీస పనితీరు అవసరాలను తీర్చగల Ag-RDTలు ప్రాథమిక కేసును గుర్తించడం, కాంటాక్ట్ ట్రేసింగ్, వ్యాప్తి పరిశోధనల సమయంలో మరియు సంఘాల్లో వ్యాధి సంభవం యొక్క ధోరణులను పర్యవేక్షించడం కోసం ఉపయోగించవచ్చు.
లక్షణాలు
● సమగ్ర:ఒక పరీక్షలో మూడు లక్ష్య జన్యువు గుర్తించబడుతుంది
● అనుకూలమైనది:CY5, FAM, VIC/HEX ఛానెల్‌లతో సాధారణ పరికరాలకు అనుకూలమైనది.
● అద్భుతమైన పనితీరు:అధిక సున్నితత్వం మరియు నిర్దిష్టత, LOD = 200 కాపీలు/ml.
సాంకేతిక పరామితి
| ప్యాకింగ్ స్పెసిఫికేషన్ | 50 పరీక్షలు/కిట్, 100 పరీక్షలు/కిట్ |
| లక్ష్య ప్రాంతం | ORF1ab, N, E |
| వర్తించే నమూనా | కఫం, ఓరోఫారింజియల్ స్వాబ్ |
| గుర్తింపు పరిమితి | 200 కాపీలు/మి.లీ |
| మొత్తం యాదృచ్చిక రేటు | 99.55% |
| Ct విలువ (CV,%) | ≤5.0% |
| అనుకూల యాదృచ్చిక రేటు | 99.12% |
| ప్రతికూల యాదృచ్చిక రేటు | 100% |
| నిల్వ పరిస్థితులు మరియు గడువు తేదీ | -20±5℃ వద్ద నిల్వ చేయబడుతుంది మరియు 12 నెలల పాటు తాత్కాలికంగా చెల్లుబాటు అవుతుంది. |
| అంతర్గత నియంత్రణ | అవును |
| కేటలాగ్ సంఖ్య | A7793YF-50T, A7793YF-100T |
| సర్టిఫికేషన్ | CE |
| నమూనాలు | నాసోఫారింజియల్ స్వాబ్, ఓరోఫారింజియల్ స్వాబ్, అల్వియోలార్ లావేజ్ ఫ్లూయిడ్, లాలాజలం మరియు కఫం |
| వర్తించే పరికరం | ABI 7500, రోచె లైట్ సైక్లర్ 480Ⅱ , రోచె కోబాస్ z 480, SLAN-96P రియల్-టైమ్ PCR సిస్టమ్ |
పరీక్ష విధానం
1. న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత
వెలికితీత కిట్ యొక్క మాన్యువల్ ప్రకారం ఆపరేషన్ నిర్వహించబడాలి.
2. సిస్టమ్ తయారీ:
1) రియాజెంట్‌ని బయటకు తీసి, రియాజెంట్‌ను పూర్తిగా కరిగించండి.మిశ్రమాన్ని విలోమం చేసి వెంటనే సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయండి.N పరీక్ష ప్రతిచర్యలు (N = పరీక్షించాల్సిన నమూనాల సంఖ్య + సానుకూల నియంత్రణ + ప్రతికూల నియంత్రణ + 1) ప్రతిచర్య వ్యవస్థల కోసం వరుసగా ఈ క్రింది విధంగా తయారు చేయబడతాయి.
| Vomponentss | 1 రియాక్షన్ సిస్టమ్ కోసం వాల్యూమ్ | N రియాక్షన్ సిస్టమ్ కోసం వాల్యూమ్ |
| న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ యాంప్లిఫికేషన్ రియాక్షన్ సొల్యూషన్ మిక్స్ (A7793YF) | 18 µL | 18 µL * N |
| ఎంజైమ్ మిశ్రమం | 2 μL | 2 µL * N |
| మొత్తం వాల్యూమ్ | 20 μL | 20 µL * N |
2) రియాక్షన్ డిస్ట్రిబ్యూషన్: రియాక్షన్ సొల్యూషన్ మిశ్రమంగా మరియు సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయబడింది మరియు ఫ్లోరోసెన్స్ PCR ఉపకరణానికి అనువైన PCR ట్యూబ్‌లో ప్రతి ట్యూబ్ 20μL మొత్తంలో పంపిణీ చేయబడింది.
3. లోడ్ అవుతోంది
సంగ్రహించిన నమూనా న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం యొక్క 5μL, సానుకూల నియంత్రణ న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం మరియు ప్రతికూల నియంత్రణ న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం ప్రతిచర్య వ్యవస్థలకు జోడించబడతాయి మరియు మొత్తం ప్రతిచర్య పరిమాణం 25μL.ట్యూబ్ కవర్‌ను బిగించి, సెంట్రిఫ్యూగేషన్ చేసిన కొన్ని సెకన్ల తర్వాత దాన్ని యాంప్లిఫికేషన్ పరీక్ష ప్రాంతానికి తరలించండి.
4. PCR యాంప్లిఫికేషన్ అస్సే
1) యాంప్లిఫికేషన్ డిటెక్షన్ కోసం PCR రియాక్షన్ ట్యూబ్‌ను ఫ్లోరోసెంట్ PCR యాంప్లిఫికేషన్ పరికరంలో ఉంచండి.
2) సైకిల్ పరామితి సెట్టింగ్:
| కార్యక్రమం | చక్రాల సంఖ్య | ఉష్ణోగ్రత | ప్రతిస్పందన సమయం | |
| 1 | 1 | 50℃ | 10 నిమి | |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 సె | |
| 3 | 45 | 95℃ | 5 సె | |
| 60℃ | 30 సె | ఫ్లోరోసెన్స్ కలెక్షన్ | ||
3) గుర్తింపు సెట్టింగ్‌లు:
గుర్తింపు ఛానెల్‌లు వరుసగా ORF1ab, N జన్యువు మరియు E జీన్, RNase P అంతర్గత నియంత్రణకు అనుగుణంగా FAM, VIC , ROX మరియు CY5 లకు సెట్ చేయబడ్డాయి.ABI 7500 పరికరం కోసం "క్వెంచర్ డై" మరియు "పాసివ్ రిఫరెన్స్" "ఏదీ కాదు"కి సెట్ చేయబడ్డాయి.నమూనాలు అనుగుణంగా ఉండే క్రమంలో సానుకూల నియంత్రణ, ప్రతికూల నియంత్రణ మరియు నమూనా (తెలియదు) సెట్ చేయండి మరియు "నమూనా పేరు" నిలువు వరుసలో నమూనా పేరును సెట్ చేయండి.
X-POCH16 కోసం, ఆపరేషన్ మరియు ప్రోగ్రామ్ క్రింది విధంగా ఉన్నాయి:
1) స్వీయ-పరీక్ష పూర్తయిన తర్వాత, మూత తెరిచి, PCR రియాక్షన్ ట్యూబ్‌లను పరికరంలోని నిర్దేశిత స్థానాల్లో ఉంచండి.
2) "Exper"ని ఎంచుకోవడం ద్వారా ప్రారంభించండి.ఎంపిక."అన్నీ" ఎంపికను ఎంచుకోండి లేదా స్క్రీన్ ఎడమ వైపున ఉన్న ప్రతిచర్య ప్రాంతాన్ని మాన్యువల్‌గా ఎంచుకోండి.
3) "లోడ్" ఎంపికను ఎంచుకోండి;పరీక్ష ప్రోగ్రామ్‌ను ఎంచుకోండి;"పూర్తయింది" మరియు "రన్" క్లిక్ చేయండి.కార్యక్రమం పూర్తి కావడానికి 30నిమి.42లు పడుతుంది.
డిఫాల్ట్ ప్రోగ్రామ్ యొక్క గుర్తింపు ఛానెల్‌లు వరుసగా ORF1ab, N జన్యువు మరియు E జీన్, RNase P అంతర్గత నియంత్రణకు అనుగుణంగా FAM, VIC, ROX మరియు CY5లకు సెట్ చేయబడ్డాయి.
డిఫాల్ట్ ప్రోగ్రామ్ యొక్క సైకిల్ పరామితి క్రింది విధంగా ఉంది:
| కార్యక్రమం | సంఖ్య | ఉష్ణోగ్రత | ప్రతిస్పందన సమయం |
| 1 | 1 | 50℃ | 2నిమి |
| 2 | 1 | 95℃ | 30సె |
| 3 | 41 | 95℃ | 2సె |
| 60℃ | 13సె | ఫ్లోరోసెన్స్ |
5. థ్రెషోల్డ్ సెట్టింగ్
విశ్లేషించబడిన చిత్రం ప్రకారం, ప్రారంభ విలువ, బేస్‌లైన్ ముగింపు విలువ మరియు థ్రెషోల్డ్ విలువను సర్దుబాటు చేయండి (ప్రారంభ విలువ మరియు ముగింపు విలువ వరుసగా 3 మరియు 15గా సెట్ చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది మరియు ప్రతికూల నియంత్రణ యొక్క యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్ ఫ్లాట్‌గా సర్దుబాటు చేయబడుతుంది లేదా థ్రెషోల్డ్ లైన్ కంటే తక్కువ), విశ్లేషణ నమూనా Ct విలువను స్వయంచాలకంగా పొందడానికి విశ్లేషణను క్లిక్ చేయండి.రిపోర్ట్ ఇంటర్‌ఫేస్‌లో ఫలితాలను వీక్షించండి.
6. నాణ్యత నియంత్రణ ప్రమాణం
కిట్ యొక్క ప్రతి నియంత్రణ తప్పనిసరిగా 'S' వక్రతతో కింది అవసరాలను తీర్చాలి, లేకుంటే ప్రయోగం చెల్లదు.
| గుర్తింపు ఛానెల్‌లు | ప్రతికూల నియంత్రణ | సానుకూల నియంత్రణ |
| FAM(ORF1ab) | Ct లేదు | Ct≤38 |
| VIC(N) | Ct లేదు | Ct≤38 |
| ROX(E) | Ct లేదు | Ct≤38 |
| CY5(RP) | Ct లేదు | Ct≤38 |
【కట్-ఆఫ్ విలువ】
100 ఓరోఫారింజియల్ శుభ్రముపరచు నమూనాలు మరియు 100 కఫం నమూనాల ఫలితాల ప్రకారం మరియు ROC కర్వ్ పద్ధతితో, ఈ కిట్ యొక్క OFR1ab, N జన్యువుల E జన్యువు యొక్క కట్-ఆఫ్ విలువ Ct = 38
ఎఫ్ ఎ క్యూ
ఈ కిట్‌లో, రియల్ టైమ్ ఫ్లోరోసెంట్ PCR టెక్నాలజీ యొక్క ప్రైమర్‌లు మరియు ప్రోబ్‌లు వరుసగా 2019-nCoV యొక్క ORF1ab, N మరియు E జన్యువు యొక్క సంరక్షించబడిన మరియు నిర్దిష్ట ప్రాంతాలకు రూపొందించబడ్డాయి.PCR యాంప్లిఫికేషన్ సమయంలో, ప్రోబ్ టెంప్లేట్‌తో బంధిస్తుంది మరియు ప్రోబ్ యొక్క 5'-ఎండ్ రిపోర్టర్ గ్రూప్ టాక్ ఎంజైమ్ (5'→3' ఎక్సోన్యూకలీస్ యాక్టివిటీ) ద్వారా విడదీయబడుతుంది, తద్వారా ఫ్లోరోసెంట్ సిగ్నల్‌ను రూపొందించడానికి క్వెన్చింగ్ గ్రూప్ నుండి దూరంగా ఉంటుంది. .నిజ-సమయ యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్ కనుగొనబడిన ఫ్లోరోసెన్స్ సిగ్నల్ ఆధారంగా స్వయంచాలకంగా ప్లాట్ చేయబడుతుంది మరియు నమూనా Ct విలువ లెక్కించబడుతుంది.FAM, VIC మరియు ROX ఫ్లోరోఫోర్స్‌లు ORF1ab జన్యువు, N జన్యువు మరియు E జన్యు ప్రోబ్స్‌కు లేబుల్ చేయబడ్డాయి.ఒక పరీక్షను ఉపయోగించడం ద్వారా, 2019-nCoV యొక్క పై మూడు జన్యువుల గుణాత్మక గుర్తింపును ఏకకాలంలో నిర్వహించవచ్చు.
తప్పుడు-ప్రతికూల ఫలితాలను నివారించడానికి క్లినికల్ నమూనాల సేకరణ, నిర్వహణ, వెలికితీత మరియు RT-PCR ప్రక్రియను పర్యవేక్షించడానికి RNase P జన్యువును లక్ష్యంగా చేసుకుని అంతర్గత నియంత్రణతో కిట్ అందించబడింది.అంతర్గత నియంత్రణ CY5 ఫ్లోరోసెంట్ సమూహంతో లేబుల్ చేయబడింది.
1. పరికరం సాధారణమైనప్పుడు పరీక్ష ఫలితాలను విశ్లేషించండి మరియు వివరించండి మరియు సానుకూల నియంత్రణ, ప్రతికూల నియంత్రణ మరియు అంతర్గత నియంత్రణ పరీక్ష ఫలితం నాణ్యత నియంత్రణ ప్రమాణానికి అనుగుణంగా ఉంటాయి.
2. అంతర్గత నియంత్రణ యొక్క యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్ (CY5) సాధారణ S వక్రరేఖ మరియు Ct ≤ 38ని చూపుతుంది, లక్ష్య జన్యువుల ఫలితాలు క్రింది షరతులకు లోబడి ఉంటాయి.
| గుర్తింపు ఛానెల్‌లు | లక్ష్య జన్యువుల ఫలితాలను వివరించడం | ||
| FMA | VIC (N జన్యువు) | ROX (E జన్యువు) | |
| Ct≤38 | Ct≤38 | Ct≤38 | సాధారణ S యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్‌తో, Ct విలువ≤38, సంబంధిత లక్ష్య జన్యువు సానుకూలంగా ఉంటుంది. |
| 38 x సిటి 40 | 38 x సిటి 40 | 38 x సిటి 40 | సాధారణ S యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్‌తో, నమూనా యొక్క సంబంధిత లక్ష్య జన్యువును మళ్లీ పరీక్షించండి. ఒక సాధారణ S యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్‌తో Ct విలువ＜ 40 ఉంటే, సంబంధిత లక్ష్య జన్యువు సానుకూలంగా ఉంటుంది;Ct విలువ≥40 అయితే, సంబంధిత లక్ష్య జన్యువు ప్రతికూలంగా ఉంటుంది |
| Ct≥40 | Ct≥40 | Ct≥40 | సంబంధిత లక్ష్య జన్యువు ప్రతికూలంగా ఉంటుంది |
2019-nCoV ఫలితాల వివరణ:
ORF1ab, N జన్యువు మరియు E జన్యువు ఫలితాల ప్రకారం, ఈ క్రింది విధంగా వివరణ:
1) కనుగొనబడిన జన్యువులలో రెండు లేదా మూడు జన్యువులు సానుకూలంగా ఉంటే, 2019-nCoV సానుకూలంగా ఉంటుంది;
2) కనుగొనబడిన జన్యువులలో ఒకటి లేదా ఏదీ సానుకూలంగా ఉంటే, 2019-nCoV ప్రతికూలంగా ఉంటుంది.
గమనిక: సానుకూల నమూనా యొక్క యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్ సాధారణ S వక్రరేఖతో ఉండాలి.అయితే, లక్ష్యం ఏకాగ్రత చాలా ఎక్కువగా ఉంటే, అంతర్గత ప్రామాణిక నియంత్రణ విస్తరించబడకపోవచ్చు మరియు నమూనా నేరుగా సానుకూలంగా నిర్ణయించబడుతుంది.లక్ష్య జన్యువులలో ఏవైనా రెండు Ct≤38ని పొందినట్లయితే, 2019-nCoV సానుకూలంగా ఉంటుంది.లక్ష్య జన్యువులలో ఏవైనా రెండు Ct≥40ని పొందినట్లయితే, 2019-nCoV ప్రతికూలంగా ఉంటుంది.Ct≥40, లేదా విలువను చూపకపోతే, లక్ష్య జన్యువు యొక్క ఫలితాలు ప్రతికూలంగా ఉంటాయి.
3. FAM, VIC, ROX మరియు Cy5 ఛానెల్‌ల యొక్క అన్ని Ct విలువలు 38 కంటే ఎక్కువ ఉంటే లేదా స్పష్టమైన విలక్షణమైన S యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్ లేనట్లయితే:
1) PCR ప్రతిచర్యను నిరోధించే పదార్ధం(లు) నమూనాలో ఉన్నాయి.మళ్లీ పరీక్షించడం కోసం నమూనాను పలుచన చేయాలని సిఫార్సు చేయబడింది.
2) న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత ప్రక్రియ అసాధారణమైనది, కాబట్టి తిరిగి సంగ్రహించమని సూచించబడింది
తిరిగి పరీక్ష కోసం న్యూక్లియిక్ ఆమ్లం.
3) ఈ నమూనా నమూనా సమయంలో అర్హత కలిగిన నమూనా కాదు లేదా అధోకరణం చెందింది
రవాణా మరియు నిల్వ సమయంలో.
మేము ఈ పరిస్థితులను గుర్తించగల 2 మార్గాలు: NAAT మరియు యాంటిజెన్.
(లాస్ ఏంజిల్స్ యొక్క CDC నుండి వచ్చింది)
