פּראָדוקט דעטאַל
די וועלט געזונט ארגאניזאציע (WHO) פירער אַז אַנטיגען-דיטעקטינג גיך דיאַגנאָסטיק טעסץ (Ag-RDRs) קענען פאָרשלאָגן אַ פאַסטער און ווייניקער טייַער וועג צו דיאַגנאָזירן אַקטיוו סאַרס-קאָוו -2 ינפעקציע ווי נוקלעיק זויער אַמפּלאַפאַקיישאַן טעסץ (NAATs), און WHO אויך רעקאַמענדז. אַז Ag-RDTs טרעפן מינימום פאָרשטעלונג רעקווירעמענץ קענען זיין געוויינט פֿאַר ערשטיק פאַל דיטעקשאַן, קאָנטאַקט טרייסינג, בעשאַס ויסברוך ינוועסטאַגיישאַנז און צו מאָניטאָר טרענדס פון קרענק ינסידאַנס אין קהילות.
איינריכטונגען
● פולשטענדיק:דריי ציל דזשין דיטעקץ אין איין פּראָבע
● קאַמפּאַטאַבאַל:אַדאַפּטיוו צו פּראָסט ויסריכט מיט CY5, FAM, VIC / HEX טשאַנאַלז.
● ויסגעצייכנט פאָרשטעלונג:הויך סענסיטיוויטי און ספּעסיפיקאַטי, לאָד = 200 קאפיעס / מל.
טעכניש פּאַראַמעטער
| פּאַקינג ספּעסיפיקאַטיאָן | 50 טעסץ / קיט, 100 טעסץ / קיט |
| ציל קאנט | ORF1ab, N, E |
| אָנווענדלעך מוסטער | ספּוטום, אָראָפאַרינגעאַל ווישער |
| לימיט פון דעטעקשאַן | 200 קאפיעס / מל |
| גאַנץ קאָוינסידאַנס קורס | 99.55% |
| Ct ווערט (CV,%) | ≤5.0% |
| Positive קאָוינסידאַנס קורס | 99.12% |
| נעגאַטיוו קאָוינסידאַנס קורס | 100% |
| סטאָרידזש טנאָים און עקספּיריישאַן טאָג | סטאָרד ביי -20±5℃ און איז גילטיק דערווייַל פֿאַר 12 חדשים. |
| אינערלעכער קאָנטראָל | יא |
| קאַטאַלאָג נומער | A7793YF-50T, A7793YF-100T |
| Certification | CE |
| ספּעסאַמאַנז | נאַסאָפאַרינגעאַל ווישער, אָראָפאַרינגעאַל ווישער, אַלוועאָלאַר לאַוואַגע פליסיק, שפּייַעכץ און ספּוטום |
| אָנווענדלעך ינסטרומענט | ABI 7500, Roche Light Cycler 480Ⅱ, Roche Cobas z 480, SLAN-96P Real-Time PCR System |
טעסט פּראָצעדור
1. נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן
אָפּעראַציע זאָל זיין געפירט אויס לויט די מאַנואַל פון יקסטראַקשאַן קיט.
2. סיסטעם צוגרייטונג:
1) נעמען אויס די רייידזשאַנט און טאָ די רייידזשאַנט גאָר.יבערקערן די געמיש און סענטריפודזש מיד.ען פּרובירן ריאַקשאַנז (N = נומער פון סאַמפּאַלז צו זיין טעסטעד + positive קאָנטראָל + נעגאַטיוו קאָנטראָל + 1) זענען ריספּעקטיוולי צוגעגרייט פֿאַר אָפּרוף סיסטעמען, ווי גייט.
| וואָפּאָנענץ | באַנד פֿאַר 1 אָפּרוף סיסטעם | באַנד פֿאַר N אָפּרוף סיסטעם |
| נוקלעיק זויער אַמפּלאַפאַקיישאַן רעאַקציע לייזונג מיקס (A7793YF) | 18 μל | 18 μL * N |
| ענזיים געמיש | 2 μל | 2 μL * N |
| גאַנץ באַנד | 20 μל | 20 μL * N |
2) רעאַקציע פאַרשפּרייטונג: דער אָפּרוף לייזונג איז געווען געמישט און סענטריפוגעד, און יעדער רער איז דיספּענסט אין אַ סומע פון 20μ ל אין אַ פּקר רער פּאַסיק פֿאַר אַ פלורעסאַנס פּקר אַפּאַראַט.
3. לאָודינג
5 μ ל פון די יקסטראַקטיד מוסטער נוקלעיק זויער, positive קאָנטראָל נוקלעיק זויער און נעגאַטיוו קאָנטראָל נוקלעיק זויער זענען מוסיף צו די אָפּרוף סיסטעמען, און די גאַנץ אָפּרוף באַנד איז 25 μ ל.פאַסטען די רער דעקן און מאַך עס צו די אַמפּלאַפאַקיישאַן פּרובירן געגנט נאָך אַ ביסל סעקונדעס פון סענטריפוגיישאַן.
4. פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן אַססייַ
1) שטעלן די פּקר אָפּרוף רער אין די פלורעסאַנט פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן קיילע פֿאַר אַמפּלאַפאַקיישאַן דיטעקשאַן.
2) ציקל פּאַראַמעטער באַשטעטיקן:
| פּראָגראַם | נומער פון סייקאַלז | טעמפּעראַטור | רעאקציע צייט | |
| 1 | 1 | 50℃ | 10 מין | |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 סעק | |
| 3 | 45 | 95℃ | 5 סעק | |
| 60℃ | 30 סעק | פלואָרעססענסע זאַמלונג | ||
3) דעטעקשאַן סעטטינגס:
די דיטעקשאַן טשאַנאַלז זענען באַשטימט צו FAM, VIC, ROX און CY5, קאָראַספּאַנדינג צו ORF1ab, N דזשין און E Gene, RNase P ינערלעך קאָנטראָל, ריספּעקטיוולי."קווענטשער פאַרב" און "פּאַסיוו רעפערענץ" זענען באַשטימט צו "קיין" פֿאַר די ABI 7500 קיילע.שטעלן די positive קאָנטראָל, נעגאַטיוו קאָנטראָל, און מוסטער (אומבאַקאַנט) אין סדר אין וואָס די סאַמפּאַלז שטימען, און שטעלן די מוסטער נאָמען אין די "סאַמפּלע נאָמען" זייַל.
פֿאַר X-POCH16, די אָפּעראַציע און פּראָגראַם זענען ווי גייט:
1) נאָך די זיך-פּרובירן איז גאַנץ, עפענען די דעקל און שטעלן די PCR אָפּרוף טובז אין די דעזיגנייטיד שטעלעס אין די קיילע.
2) אָנהייב דורך סעלעקטירן דעם "עקספּער."אָפּציע.סעלעקטירן דעם "אַלע" אָפּציע אָדער מאַניואַלי סעלעקטירן דעם אָפּרוף געגנט אויף די לינקס זייַט פון דעם עקראַן.
3) אויסקלייַבן די "LOAD" אָפּציע;אויסקלייַבן די פּראָבע פּראָגראַם;גיט "DONE" און די "RUN".דער פּראָגראַם נעמט 30 מינוט 42 ס צו פאַרענדיקן.
די דיטעקשאַן טשאַנאַלז פון די דיפאָלט פּראָגראַם זענען באַשטימט צו FAM, VIC, ROX און CY5, קאָראַספּאַנדינג צו ORF1ab, N דזשין און E Gene, RNase P ינערלעך קאָנטראָל, ריספּעקטיוולי.
די ציקל פּאַראַמעטער פון די דיפאָלט פּראָגראַם זענען ווי גייט:
| פּראָגראַם | נומער פון | טעמפּעראַטור | רעאקציע צייט |
| 1 | 1 | 50℃ | 2מין |
| 2 | 1 | 95℃ | 30 סעק |
| 3 | 41 | 95℃ | 2 סעק |
| 60℃ | 13 סעק | פלורעסאַנס |
5. שוועל באַשטעטיקן
לויט די אַנאַלייזד בילד, סטרויערן די אָנהייב ווערט, סוף ווערט פון באַסעלינע און שוועל ווערט (אָנהייב ווערט און סוף ווערט איז רעקאַמענדיד צו זיין 3 און 15 ריספּעקטיוולי, און די אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג פון די נעגאַטיוו קאָנטראָל איז אַדזשאַסטיד צו זיין פלאַך אָדער נידעריקער ווי די שוועל ליניע), גיט אַנאַליסיס צו אויטאָמאַטיש באַקומען די אַנאַליסיס די מוסטער Ct ווערט.קוק די רעזולטאַטן אין די באריכט צובינד.
6. קוואַליטי קאָנטראָל סטאַנדאַרד
יעדער קאָנטראָל פון די קיט מוזן טרעפן די פאלגענדע באדערפענישן מיט 'S' ויסבייג, אַנדערש דער עקספּערימענט איז פאַרקריפּלט.
| דעטעקשאַן טשאַנאַלז | נעגאַטיוו קאָנטראָל | positive קאָנטראָל |
| FAM(ORF1ab) | קיין קט | Ct≤38 |
| VIC(N) | קיין קט | Ct≤38 |
| ROX(E) | קיין קט | Ct≤38 |
| CY5(RP) | קיין קט | Ct≤38 |
【שנייַדן ווערט】
לויט די רעזולטאַטן פון 100 סאַמפּאַלז פון אָראָפאַרינגעאַל ווישער און 100 ספּוטום סאַמפּאַלז, און מיט די ROC ויסבייג אופֿן, די קאַט-אַוועק ווערט פון די OFR1ab, N גענעס E גענע פון דעם קיט זענען Ct = 38
FAQ
אין דעם קיט, אָנפאַנגער און פּראָבעס פון פאַקטיש-צייט פלורעסאַנט פּקר טעכנאָלאָגיע זענען דיזיינד צו די קאַנסערווד און ספּעציפיש מקומות פון די ORF1ab, N און E דזשין פון 2019-nCoV ריספּעקטיוולי.בעשאַס פּקר אַמפּלאַפאַקיישאַן, די זאָנד ביינדז צו די מוסטער, און די 5'-סוף רעפּאָרטער גרופּע פון דער זאָנד איז קלעאַוועד דורך די טאַק ענזיים (5'→3' עקסאָנוקלאַסע טעטיקייט), דערמיט מאָווינג אַוועק פון די קווענטשינג גרופּע צו דזשענערייט אַ פלורעסאַנט סיגנאַל. .די פאַקטיש-צייט אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג איז אויטאָמאַטיש פּלאַננעד באזירט אויף די דיטעקטאַד פלואָרעססענסע סיגנאַל, און די מוסטער Ct ווערט איז קאַלקיאַלייטיד.FAM, VIC און ROX פלואָראָפאָרעס זענען לייבאַלד צו ORF1ab דזשין, N דזשין און E דזשין פּראָבעס.מיט איין פּראָבע, קוואַליטאַטיווע דיטעקשאַן פון די אויבן דריי גענעס פון 2019-nCoV קענען זיין סיימאַלטייניאַסלי דורכגעקאָכט.
די קיט איז צוגעשטעלט מיט אַן ינערלעך קאָנטראָל טאַרגאַטינג די RNase P דזשין צו מאָניטאָר קליניש סאַמפּאַלז זאַמלונג, האַנדלינג, יקסטראַקשאַן און RT-PCR פּראָצעס צו ויסמיידן פאַלש-נעגאַטיוו רעזולטאַטן.די ינערלעך קאָנטראָל איז לייבאַלד מיט אַ CY5 פלורעסאַנט גרופּע.
1. פונאַנדערקלייַבן און טייַטשן די טעסט רעזולטאַטן ווען די קיילע איז נאָרמאַל, און די positive קאָנטראָל, די נעגאַטיוו קאָנטראָל און די ינערלעך קאָנטראָל פּרובירן רעזולטאַט טרעפן די קוואַליטעט קאָנטראָל נאָרמאַל.
2. די אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג פון ינערלעך קאָנטראָל (CY5) ווייַזן אַ טיפּיש ס ויסבייג און Ct ≤ 38, ינטערפּריטיישאַן פון די רעזולטאַטן פון ציל גענעס איז אונטערטעניק צו די פאלגענדע טנאָים.
| דעטעקשאַן טשאַנאַלז | ינטערפּריטיישאַן די רעזולטאַטן פון ציל גענעס | ||
| פמאַ | VIC (N גענע) | ROX (E דזשין) | |
| Ct≤38 | Ct≤38 | Ct≤38 | מיט אַ טיפּיש ס אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג, די Ct ווערט איז ≤38, די קאָראַספּאַנדינג ציל דזשין איז positive. |
| 38 ¼ קט ¼ 40 | 38 ¼ קט ¼ 40 | 38 ¼ קט ¼ 40 | מיט אַ טיפּיש ס אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג, פּרובירן ווידער די קאָראַספּאַנדינג ציל דזשין פון די מוסטער. אויב די Ct ווערט ＜ 40 מיט אַ טיפּיש ס אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג, די קאָראַספּאַנדינג ציל דזשין איז positive;אויב די Ct ווערט ≥40, די קאָראַספּאַנדינג ציל דזשין איז נעגאַטיוו |
| Ct≥40 | Ct≥40 | Ct≥40 | די קאָראַספּאַנדינג ציל דזשין איז נעגאַטיוו |
ינטערפּריטיישאַן פון רעזולטאַטן פֿאַר 2019-nCoV:
לויט די רעזולטאַטן פון ORF1ab, N דזשין און E דזשין, ינטערפּריטיישאַן ווי גייט:
1) אויב צוויי אָדער דריי גענעס פון די דיטעקטאַד גענעס זענען positive, די 2019-nCoV איז positive;
2) אויב בלויז איין אָדער גאָרניט פון די דיטעקטאַד גענעס איז positive, די 2019-nCoV איז נעגאַטיוו.
באַמערקונג: די אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג פון די positive מוסטער זאָל זיין מיט אַ טיפּיש S ויסבייג.אָבער, אויב די ציל קאַנסאַנטריישאַן איז צו הויך, די ינערלעך נאָרמאַל קאָנטראָל קען נישט זיין אַמפּלאַפייד און די מוסטער קענען זיין גלייך געמשפט ווי positive.אויב צוויי פון די ציל גענעס באַקומען Ct≤38, די 2019-nCoV איז positive.אויב צוויי פון ציל גענעס באַקומען Ct≥40, די 2019-nCoV איז נעגאַטיוו.אויב Ct≥40, אָדער ווייַזן קיין ווערט, ינטערפּריטיישאַן די רעזולטאַטן פון ציל דזשין זענען נעגאַטיוו.
3. אויב אַלע די Ct וואַלועס פון FAM, VIC, ROX און Cy5 טשאַנאַלז זענען מער ווי 38 אָדער עס איז קיין קלאָר ווי דער טאָג טיפּיש ס אַמפּלאַפאַקיישאַן ויסבייג:
1) עס זענען סאַבסטאַנסיז אין די מוסטער וואָס ינכיבאַט די פּקר אָפּרוף.עס איז רעקאַמענדיד צו צעפירן די מוסטער פֿאַר רי-טעסטעד.
2) דער פּראָצעס פון נוקלעיק זויער יקסטראַקשאַן איז אַבנאָרמאַל, אַזוי עס איז סאַגדזשעסטיד צו שייַעך-עקסטראַקט
נוקלעיק זויער פֿאַר שייַעך-פּרובירן.
3) דער מוסטער איז נישט אַ קוואַלאַפייד מוסטער אין דער צייט פון מוסטערונג, אָדער דיגריידיד
בעשאַס טראַנספּערטיישאַן און סטאָרידזש.
עס זענען 2 וועגן וואָס מיר קענען דיטעקטאַד די סיטואַטיאָנס: NAAT און אַנטיגען.
(קומט פון CDC פון לאס אנדזשעלעס)
